U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

A U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple é uma linha celular de osteossarcoma geneticamente modificada derivada da linha celular humana U-2 OS, conhecida pelas suas caraterísticas de crescimento robustas e utilidade em vários estudos biológicos. Este clone específico foi modificado utilizando a tecnologia de edição de genes CRISPR/Cas9 para incorporar mMaple, uma proteína fluorescente fotoconversível, no gene NUP96. A proteína mMaple permite a utilização de técnicas avançadas de imagiologia, como a imagiologia de células vivas e a microscopia de super-resolução, proporcionando uma visão dinâmica do comportamento do complexo de poros nucleares (NPC) e dos mecanismos de importação-exportação celular através do envelope nuclear.

O gene NUP96, que codifica um componente crucial do NPC, é vital para o transporte nucleocitoplasmático. A alteração do NUP96 pode afetar não só os mecanismos de transporte, mas também a arquitetura e a função nucleares em geral. Assim, esta linha celular constitui um excelente modelo para estudar patologias relacionadas com o NPC e o papel do transporte nuclear no metabolismo e na sinalização celular. A integração do mMaple na NUP96 permite o rastreio e a visualização em tempo real da dinâmica da NUP96 in vivo, tornando-a uma ferramenta indispensável para os investigadores que se dedicam ao estudo do núcleo celular e para os que exploram as implicações das disfunções da NPC em doenças como o cancro e as infecções virais.

Como ferramenta especializada, o clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple n.º 16 suporta imagens de alta resolução e fornece dados substanciais sobre a distribuição espacial e temporal dos componentes do NPC. É particularmente valioso para experiências que requerem uma análise detalhada da expressão genética, localização de proteínas e transporte nuclear em condições fisiológicas e patológicas, facilitando uma compreensão mais profunda dos processos celulares a nível molecular.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia