U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งกระดูกชนิด osteosarcoma ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมจากสายพันธุ์เซลล์มนุษย์ U-2 OS ซึ่งมีลักษณะการเจริญเติบโตที่แข็งแรงและใช้ประโยชน์ในงานวิจัยทางชีววิทยาต่าง ๆ ได้เป็นอย่างดี สายพันธุ์นี้ได้รับการดัดแปลงโดยใช้เทคโนโลยีการแก้ไขยีน CRISPR/Cas9 เพื่อนำ mMaple ซึ่งเป็นโปรตีนเรืองแสงที่สามารถเปลี่ยนสีได้ด้วยแสง เข้าสู่ยีน NUP96โปรตีน mMaple ช่วยให้สามารถใช้วิธีการถ่ายภาพขั้นสูง เช่น การถ่ายภาพเซลล์แบบเรียลไทม์และการใช้กล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูงพิเศษ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกแบบไดนามิกเกี่ยวกับพฤติกรรมของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียส (NPC) และกลไกการนำเข้า-ส่งออกของเซลล์ผ่านเยื่อหุ้มนิวเคลียส

ยีน NUP96 ซึ่งเข้ารหัสองค์ประกอบสำคัญของ NPC มีความสำคัญต่อการขนส่งนิวเคลียสและไซโตพลาสซึม การเปลี่ยนแปลงของ NUP96 สามารถส่งผลกระทบไม่เพียงแต่กลไกการขนส่งเท่านั้น แต่ยังรวมถึงโครงสร้างและหน้าที่ของนิวเคลียสโดยรวมด้วย ดังนั้น สายเซลล์นี้จึงเป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาพยาธิสภาพที่เกี่ยวข้องกับ NPC และบทบาทของการขนส่งนิวเคลียสในเมแทบอลิซึมและการส่งสัญญาณของเซลล์การผสานรวม mMaple เข้ากับ NUP96 ช่วยให้สามารถติดตามและแสดงภาพพลวัตของ NUP96 แบบเรียลไทม์ในสิ่งมีชีวิตได้ ซึ่งทำให้เป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้สำหรับนักวิจัยที่มุ่งเน้นการศึกษาเกี่ยวกับนิวเคลียสของเซลล์และผู้ที่กำลังสำรวจผลกระทบของการทำงานผิดปกติของ NPC ในโรคต่างๆ เช่น มะเร็งและการติดเชื้อไวรัส

ในฐานะเครื่องมือเฉพาะทาง U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple clone no.16 รองรับการถ่ายภาพความละเอียดสูงและให้ข้อมูลที่สำคัญเกี่ยวกับการกระจายตัวเชิงพื้นที่และเชิงเวลาขององค์ประกอบของ NPC มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการทดลองที่ต้องการการวิเคราะห์รายละเอียดของการแสดงออกของยีน การกำหนดตำแหน่งของโปรตีน และการขนส่งในนิวเคลียสภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยาและพยาธิวิทยา ช่วยให้เข้าใจกระบวนการของเซลล์ในระดับโมเลกุลได้ลึกซึ้งยิ่งขึ้น

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.