Skip to content
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tissue
กระดูก
Disease
มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา

Documents

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Product number 300294

The U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 cell line represents a specialized variant of the widely used human osteosarcoma cell line U-2 OS. This particular model has be...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 เป็นสายพันธุ์เฉพาะที่พัฒนาขึ้นจากสายเซลล์มะเร็งกระดูกชนิด osteosarcoma ของมนุษย์ U-2 OS ซึ่งถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลาย โมเดลนี้ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมให้สามารถแสดงออกโปรตีน Nup107 ที่ติดแท็ก SNAP ซึ่งเป็นโปรตีนสำคัญในโครงสร้างนิวเคลียร์พอร์คอมเพล็กซ์ (nuclear pore complex) ที่จำเป็นต่อการลำเลียงโมเลกุลระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาซึมการผสานเทคโนโลยี SNAP-tag ช่วยให้สามารถติดฉลากและแสดงภาพ Nup107 ได้แบบไบโอออร์โธโกนัลทั้งในเซลล์ที่มีชีวิตและเซลล์ที่ถูกตรึง ซึ่งมอบเครื่องมืออันทรงพลังสำหรับการศึกษาการขนส่งระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาซึม รวมถึงโครงสร้างของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียร์ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยา

พื้นหลังของ U-2 OS มีข้อได้เปรียบหลายประการ รวมถึงอัตราการเจริญเติบโตที่แข็งแกร่งและลักษณะทางโครโมโซมที่ชัดเจน ซึ่งสนับสนุนการประยุกต์ใช้การคัดกรองแบบผ่านปริมาณสูงและการศึกษาทางจีโนมิกส์เทคโนโลยี ZFN (Zinc Finger Nuclease) ที่ใช้ในสายเซลล์นี้ช่วยอำนวยความสะดวกในการแก้ไขจีโนมแบบเฉพาะเจาะจง เพิ่มความแม่นยำที่นักวิจัยสามารถศึกษาการมีส่วนร่วมทางพันธุกรรมต่อการขนส่งนิวเคลียร์และกระบวนการเซลล์อื่นๆ สายเซลล์นี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการศึกษาที่มุ่งอธิบายพลวัตและการควบคุมของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียร์ในชีววิทยาของมะเร็งและสรีรวิทยาของเซลล์

เนื่องจากลักษณะเฉพาะของสายเซลล์ U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294 จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับเทคนิคการถ่ายภาพขั้นสูง รวมถึงกล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูงพิเศษ เพื่อสำรวจการทำงานของนิวคลีโอพอรินในระดับรายละเอียดที่ไม่เคยมีมาก่อน นอกจากนี้ยังเป็นทรัพยากรที่มีค่าสำหรับการพัฒนากลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่เส้นทางการขนส่งนิวเคลียร์ที่เกี่ยวข้องกับโรคต่างๆ รวมถึงมะเร็งส่วนประกอบ SNAP-tag เพิ่มความหลากหลายสำหรับการวิเคราะห์ทางชีวเคมีและโปรตีโอมิกส์เพิ่มเติม ทำให้เป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้ในสาขาชีววิทยาเซลล์และโมเลกุล

Tissue
กระดูก
Disease
มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300294)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Depositor
ห้องปฏิบัติการเอลเลนเบิร์ก (EMBL)

04Expression and susceptibility

Protein expression
SNAP-Nup107 (โปรตีนคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียร์ 107, SNAP-tag)

05Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, กลูโคส 3.0 กรัม/ลิตร, กลูตามีนที่เสถียร, โซเดียมไพรูเวต 2.0 มิลลิโมลาร์, โซเดียมไฮโดรเจนคาร์บอเนต 2.2 กรัม/ลิตร, NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
15 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน

You may also need