Pāriet uz saturu
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma

Dokumenti

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Preces numurs 300294

Šūnu līnija U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 ir plaši izmantotās cilvēka osteosarkomas šūnu līnijas U-2 OS specializēts variants. Šis konkrētais modelis ir...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 šūnu līnija ir plaši izmantotās cilvēka osteosarkomas šūnu līnijas U-2 OS specializēts variants. Šis konkrētais modelis ir izstrādāts, lai ekspresētu SNAP marķētu nukleoporīna Nup107 versiju, kas ir kodola poru kompleksa galvenā sastāvdaļa, kura ir būtiska molekulu transportēšanai starp kodolu un citoplazmu. SNAP-marķēšanas tehnoloģijas integrācija ļauj Nup107 biortogonāli marķēt un vizualizēt dzīvās vai fiksētās šūnās, nodrošinot spēcīgu instrumentu nukleocitoplazmas transporta un kodola poru kompleksa arhitektūras izpētei fizioloģiskos apstākļos.

U-2 OS fons piedāvā vairākas priekšrocības, tostarp stabilu augšanas ātrumu un labi raksturotu kariotipu, kas atbalsta augstas veiktspējas skrīninga lietojumus un genomikas pētījumus. Šajā šūnu līnijā izmantotā ZFN (Zinc Finger Nuclease) tehnoloģija atvieglo mērķtiecīgu genoma rediģēšanu, uzlabojot precizitāti, ar kādu pētnieki var izpētīt ģenētisko ietekmi uz kodola transportu un citiem šūnu procesiem. Šī šūnu līnija ir īpaši noderīga pētījumiem, kuru mērķis ir noskaidrot kodolporu kompleksu dinamiku un regulāciju vēža bioloģijā un šūnu fizioloģijā.

Pateicoties U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 Nr. 294 šūnu līnijas specializētajam raksturam, tā ir ļoti piemērota modernām attēlveidošanas metodēm, tostarp superizšķirtspējas mikroskopijai, lai vēl nebijuši detalizēti izpētītu nukleoporīnu funkcijas. Tā ir arī vērtīgs resurss, lai izstrādātu terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas uz kodola transporta ceļiem, kuri saistīti ar dažādām slimībām, tostarp vēzi. SNAP marķējuma komponents palielina daudzpusību turpmāku bioķīmisko un proteomisko analīžu veikšanai, padarot to par neaizstājamu rīku šūnu un molekulārās bioloģijas jomā.

Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Cytion kataloga numurs 300294)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
noguldītājs
Ellenberga laboratorija (EMBL)

04Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
SNAP-Nup107 (kodola poru kompleksa olbaltumviela 107, SNAP birka)

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 3,0 g/l glikozes, stabilu glutamīnu, 2,0 mM nātrija piruvāta, 2,2 g/l NaHCO3, 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
15 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis