Przejdź do treści
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak kościopochodny

Dokumenty

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Numer produktu 300294

Linia komórkowa U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 stanowi wyspecjalizowaną odmianę powszechnie stosowanej ludzkiej linii komórkowej osteosarcoma U-2 OS. Ten konkretny model został...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 stanowi wyspecjalizowany wariant szeroko stosowanej ludzkiej linii komórkowej kostniakomięsaka U-2 OS. Ten konkretny model został opracowany w celu ekspresji znakowanej SNAP wersji nukleoporyny Nup107, kluczowego składnika kompleksu porów jądrowych, który jest niezbędny do transportu cząsteczek między jądrem a cytoplazmą. Integracja technologii SNAP-tag pozwala na biorthogonalne znakowanie i wizualizację Nup107 w żywych lub utrwalonych komórkach, zapewniając potężne narzędzie do badania transportu nukleocytoplazmatycznego i architektury kompleksu porów jądrowych w warunkach fizjologicznych.

Tło U-2 OS oferuje kilka zalet, w tym solidne tempo wzrostu i dobrze scharakteryzowany kariotyp, które wspierają wysokowydajne aplikacje przesiewowe i badania genomiczne. Technologia ZFN (Zinc Finger Nuclease) zastosowana w tej linii komórkowej ułatwia ukierunkowaną edycję genomu, zwiększając precyzję, z jaką naukowcy mogą badać wkład genetyczny w transport jądrowy i inne procesy komórkowe. Ta linia komórkowa jest szczególnie przydatna w badaniach mających na celu wyjaśnienie dynamiki i regulacji kompleksów porów jądrowych w biologii nowotworów i fizjologii komórkowej.

Ze względu na wyspecjalizowany charakter linii komórkowej U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294, jest ona wysoce przystosowana do zaawansowanych technik obrazowania, w tym mikroskopii superrozdzielczej, w celu zbadania funkcji nukleoporyn z niespotykaną dotąd szczegółowością. Jest to również cenny zasób do opracowywania strategii terapeutycznych ukierunkowanych na szlaki transportu jądrowego związane z różnymi chorobami, w tym rakiem. Składnik SNAP-tag dodaje wszechstronności do dalszych analiz biochemicznych i proteomicznych, czyniąc go niezbędnym narzędziem w dziedzinie biologii komórkowej i molekularnej.

Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak kościopochodny

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (numer katalogowy Cytion 300294)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Wkładca
Laboratorium Ellenberg (EMBL)

04Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
SNAP-Nup107 (białko kompleksu porów jądrowych 107, znacznik SNAP)

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukozy, w: stabilna glutamina, w: 2,0 mM pirogronianu sodu, w: 2,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820200a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę o 10% FBS, 3,0 g/l glukozy, stabilną glutaminę, 2,0 mM pirogronianu sodu, 2,2 g/l NaHCO3, 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
15 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski