Mine otse sisu juurde
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom

Dokumendid

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Toote number 300294

Rakuliin U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 on laialdaselt kasutatava inimese osteosarkoomi rakuliini U-2 OS spetsialiseeritud variant. See konkreetne mudel on...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 rakuliin kujutab endast laialdaselt kasutatava inimese osteosarkoomi rakuliini U-2 OS spetsialiseeritud varianti. See konkreetne mudel on loodud selleks, et ekspresseerida tuumaporiini Nup107 SNAP-märgistatud versiooni, mis on tuumapoorikompleksi keskne komponent, mis on oluline molekulide transportimiseks tuuma ja tsütoplasma vahel. SNAP-märgise tehnoloogia integreerimine võimaldab Nup107 biorthogonaalset märgistamist ja visualiseerimist elus või fikseeritud rakkudes, pakkudes võimsat vahendit tuumasütoplasma transpordi ja tuumapoorikompleksi arhitektuuri uurimiseks füsioloogilistes tingimustes.

U-2 OS taustal on mitmeid eeliseid, sealhulgas tugev kasvukiirus ja hästi iseloomustatud karyotüüp, mis toetavad suure läbilaskevõimega sõeluuringu rakendusi ja genoomilisi uuringuid. Selles rakuliinis kasutatav ZFN (Zinc Finger Nuclease) tehnoloogia hõlbustab sihipärast genoomi redigeerimist, suurendades täpsust, millega teadlased saavad uurida geneetilist panust tuuma transportimisse ja muudesse rakulistesse protsessidesse. See rakuliin on eriti kasulik uuringutes, mille eesmärk on selgitada tuumapoorikomplekside dünaamikat ja regulatsiooni vähibioloogias ja rakufüsioloogias.

Tänu rakuliini U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 nr 294 spetsialiseerumisele sobib see väga hästi täiustatud pildistamismeetodite, sealhulgas superresolutsioonimikroskoopia jaoks, et uurida nukleoporiini funktsioone enneolematu detailsusega. See on ka väärtuslik ressurss erinevate haiguste, sealhulgas vähktõve puhul osalevate tuumatranspordiradadele suunatud ravistrateegiate väljatöötamiseks. SNAP-tag-komponent lisab mitmekülgsust edasiste biokeemiliste ja proteoomiliste analüüside tegemiseks, muutes selle asendamatuks vahendiks raku- ja molekulaarbioloogia valdkonnas.

Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Cytioni katalooginumber 300294)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Hoiustaja
Ellenbergi labor (EMBL)

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
SNAP-Nup107 (tuumapoorikompleksi valk 107, SNAP-tag)

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükoos, w: stabiilne glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 3,0 g/L glükoosi, stabiilse glutamiini, 2,0 mM naatriumpüruvaadi, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
15 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia