Ga naar de inhoud
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Weefsel
Bot
Ziekte
Osteosarcoom

Documenten

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Productnummer 300294

De U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107-cellijn is een gespecialiseerde variant van de veelgebruikte menselijke osteosarcoomcellijn U-2 OS. Dit specifieke model is...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 cellijn vertegenwoordigt een gespecialiseerde variant van de veelgebruikte humane osteosarcoom cellijn U-2 OS. Dit specifieke model is ontwikkeld om de SNAP-getagde versie van het nucleoporine Nup107 tot expressie te brengen, een centraal onderdeel van het nucleaire poriecomplex, dat essentieel is voor het transport van moleculen tussen de celkern en het cytoplasma. De integratie van de SNAP-tag technologie maakt de biorthogonale etikettering en visualisatie van Nup107 in levende of gefixeerde cellen mogelijk, wat een krachtig hulpmiddel biedt voor het bestuderen van nucleocytoplasmatisch transport en de architectuur van het nucleaire poriecomplex onder fysiologische omstandigheden.

De U-2 OS achtergrond biedt verschillende voordelen, waaronder robuuste groeisnelheden en een goed gekarakteriseerd karyotype, die high-throughput screeningtoepassingen en genomische studies ondersteunen. De ZFN-technologie (Zinc Finger Nuclease) die in deze cellijn wordt gebruikt, maakt gerichte genoombewerking mogelijk, waardoor onderzoekers de genetische bijdragen aan nucleair transport en andere cellulaire processen nauwkeuriger kunnen onderzoeken. Deze cellijn is vooral nuttig voor studies gericht op het ophelderen van de dynamica en regulatie van nucleaire poriecomplexen in kankerbiologie en cellulaire fysiologie.

Door de gespecialiseerde aard van de U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294 cellijn is deze uitermate geschikt voor geavanceerde beeldvormingstechnieken, waaronder superresolutiemicroscopie, om nucleoporinefuncties met ongekend detail te onderzoeken. Het is ook een waardevolle bron voor de ontwikkeling van therapeutische strategieën gericht op nucleaire transportroutes die betrokken zijn bij verschillende ziekten, waaronder kanker. De SNAP-tag component voegt veelzijdigheid toe voor verdere biochemische en proteomische analyses, waardoor het een onmisbaar hulpmiddel is op het gebied van cellulaire en moleculaire biologie.

Weefsel
Bot
Ziekte
Osteosarcoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Cytion catalogusnummer 300294)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Inlegger
Het Ellenberg Lab (EMBL)

04Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
SNAP-Nup107 (eiwit 107 van het nucleaire poriëncomplex, SNAP-tag)

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiel Glutamine, w: 2,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 3,0 g/L Glucose, stabiele Glutamine, 2,0 mM Natriumpyruvaat, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
15 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch