Gå direkte til indholdet
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Væv
Knogle
Sygdom
Osteosarkom

Dokumenter

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Varenummer 300294

Cellelinjen U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 er en specialiseret variant af den udbredte humane osteosarkom-cellelinje U-2 OS. Denne særlige model har været...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107-cellelinjen repræsenterer en specialiseret variant af den meget anvendte humane osteosarkom-cellelinje U-2 OS. Denne særlige model er blevet konstrueret til at udtrykke den SNAP-mærkede version af nukleoporinet Nup107, en central komponent i kerneporekomplekset, som er afgørende for transporten af molekyler mellem kernen og cytoplasmaet. Integrationen af SNAP-tag-teknologien giver mulighed for biorthogonal mærkning og visualisering af Nup107 i levende eller fikserede celler, hvilket giver et stærkt værktøj til at studere nukleocytoplasmatisk transport og kerneporekompleksets arkitektur under fysiologiske forhold.

U-2 OS-baggrunden giver flere fordele, herunder robuste vækstrater og en velkarakteriseret karyotype, som understøtter screeningsapplikationer med høj kapacitet og genomiske undersøgelser. ZFN-teknologien (Zinc Finger Nuclease), der anvendes i denne cellelinje, muliggør målrettet genomredigering, hvilket øger den præcision, hvormed forskere kan undersøge de genetiske bidrag til nuklear transport og andre cellulære processer. Denne cellelinje er især nyttig til undersøgelser, der har til formål at belyse dynamikken og reguleringen af nukleare porekomplekser i kræftbiologi og cellulær fysiologi.

På grund af den specialiserede karakter af U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294-cellelinjen er den yderst velegnet til avancerede billeddannelsesteknikker, herunder superopløsningsmikroskopi, til at udforske nukleoporinfunktioner i hidtil usete detaljer. Den er også en værdifuld ressource til udvikling af terapeutiske strategier rettet mod nukleare transportveje, der er involveret i forskellige sygdomme, herunder kræft. SNAP-tag-komponenten tilføjer alsidighed til yderligere biokemiske og proteomiske analyser, hvilket gør det til et uundværligt værktøj inden for celle- og molekylærbiologi.

Væv
Knogle
Sygdom
Osteosarkom

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Cytion katalognummer 300294)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Indskyder
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

04Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
SNAP-Nup107 (kerneporekompleks-protein 107, SNAP-tag)

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukose, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 3,0 g/L glukose, stabil glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
15 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk