U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple er en genetisk konstrueret osteosarkomcellelinje, der stammer fra den humane U-2 OS-cellelinje, som er kendt for sine robuste vækstegenskaber og anvendelighed i forskellige biologiske undersøgelser. Denne særlige klon er blevet modificeret ved hjælp af CRISPR/Cas9-genredigeringsteknologi for at inkorporere mMaple, et fotokonvertibelt fluorescerende protein, i NUP96-genet. MMaple-proteinet giver mulighed for avancerede billeddannelsesteknikker som levende cellebilleder og superopløsningsmikroskopi, hvilket giver dynamisk indsigt i kerneporekompleksets (NPC) opførsel og cellulære import-eksportmekanismer gennem kernehylsteret.

NUP96-genet, som koder for en vigtig komponent i NPC, er afgørende for nukleocytoplasmatisk transport. Ændringer i NUP96 kan ikke kun påvirke transportmekanismerne, men også den overordnede nukleare arkitektur og funktion. Denne cellelinje fungerer således som en fremragende model til at studere NPC-relaterede patologier og den rolle, som nuklear transport spiller i cellulær metabolisme og signalering. Integrationen af mMaple i NUP96 tillader realtidssporing og visualisering af NUP96-dynamik in vivo, hvilket gør det til et uundværligt værktøj for forskere med fokus på studier af cellekerner og dem, der undersøger konsekvenserne af NPC-dysfunktioner i sygdomme som kræft og virusinfektioner.

Som et specialiseret værktøj understøtter U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple klon nr. 16 billeddannelse i høj opløsning og giver betydelige data om den rumlige og tidsmæssige fordeling af NPC-komponenter. Det er især værdifuldt til eksperimenter, der kræver detaljeret analyse af genekspression, proteinlokalisering og nuklear transport under fysiologiske og patologiske forhold, hvilket letter en dybere forståelse af cellulære processer på molekylært niveau.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring