U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple to genetycznie zmodyfikowana linia komórek kostniakomięsaka pochodząca z ludzkiej linii komórkowej U-2 OS, znanej z silnej charakterystyki wzrostu i użyteczności w różnych badaniach biologicznych. Ten konkretny klon został zmodyfikowany przy użyciu technologii edycji genów CRISPR/Cas9 w celu włączenia mMaple, fotokonwertowalnego białka fluorescencyjnego, do genu NUP96. Białko mMaple pozwala na zaawansowane techniki obrazowania, takie jak obrazowanie żywych komórek i mikroskopia superrozdzielcza, zapewniając dynamiczny wgląd w zachowanie kompleksu porów jądrowych (NPC) i mechanizmy importu-eksportu komórek przez otoczkę jądrową.

Gen NUP96, który koduje kluczowy składnik NPC, jest niezbędny do transportu nukleocytoplazmatycznego. Zmiana NUP96 może wpływać nie tylko na mechanizmy transportu, ale także na ogólną architekturę i funkcję jądra. Ta linia komórkowa służy zatem jako doskonały model do badania patologii związanych z NPC oraz roli transportu jądrowego w metabolizmie i sygnalizacji komórkowej. Integracja mMaple z NUP96 pozwala na śledzenie w czasie rzeczywistym i wizualizację dynamiki NUP96 in vivo, co czyni go niezbędnym narzędziem dla naukowców koncentrujących się na badaniach jądra komórkowego i tych badających konsekwencje dysfunkcji NPC w chorobach takich jak rak i infekcje wirusowe.

Jako wyspecjalizowane narzędzie, klon U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple no.16 obsługuje obrazowanie w wysokiej rozdzielczości i dostarcza istotnych danych dotyczących przestrzennego i czasowego rozkładu składników NPC. Jest szczególnie cenny w eksperymentach wymagających szczegółowej analizy ekspresji genów, lokalizacji białek i transportu jądrowego w warunkach fizjologicznych i patologicznych, ułatwiając głębsze zrozumienie procesów komórkowych na poziomie molekularnym.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym