U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

La U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple es una línea celular de osteosarcoma modificada genéticamente derivada de la línea celular humana U-2 OS, conocida por sus robustas características de crecimiento y su utilidad en diversos estudios biológicos. Este clon en particular ha sido modificado utilizando la tecnología de edición genética CRISPR/Cas9 para incorporar mMaple, una proteína fluorescente fotoconvertible, al gen NUP96. La proteína mMaple permite técnicas de imagen avanzadas como la imagen de células vivas y la microscopía de súper-resolución, proporcionando una visión dinámica del comportamiento del complejo de poros nucleares (NPC) y de los mecanismos de importación-exportación celular a través de la envoltura nuclear.

El gen NUP96, que codifica un componente crucial del CNP, es vital para el transporte nucleocitoplasmático. La alteración de NUP96 puede afectar no sólo a los mecanismos de transporte, sino también a la arquitectura y función nucleares en general. Así pues, esta línea celular constituye un modelo excelente para estudiar las patologías relacionadas con el CNP y el papel del transporte nuclear en el metabolismo y la señalización celulares. La integración de mMaple en NUP96 permite el seguimiento y la visualización en tiempo real de la dinámica de NUP96 in vivo, lo que la convierte en una herramienta indispensable para los investigadores centrados en el estudio del núcleo celular y para aquellos que exploran las implicaciones de las disfunciones de la CPN en enfermedades como el cáncer y las infecciones víricas.

Como herramienta especializada, el clon U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple n.º 16 admite imágenes de alta resolución y proporciona datos sustanciales sobre la distribución espacial y temporal de los componentes de la CNF. Es especialmente valioso para experimentos que requieren un análisis detallado de la expresión génica, la localización de proteínas y el transporte nuclear en condiciones fisiológicas y patológicas, facilitando una comprensión más profunda de los procesos celulares a nivel molecular.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía