U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple è una linea cellulare di osteosarcoma geneticamente modificata derivata dalla linea cellulare umana U-2 OS, nota per le sue robuste caratteristiche di crescita e per la sua utilità in vari studi biologici. Questo particolare clone è stato modificato utilizzando la tecnologia di editing genico CRISPR/Cas9 per incorporare mMaple, una proteina fluorescente fotoconvertibile, nel gene NUP96. La proteina mMaple consente di utilizzare tecniche di imaging avanzate come l'imaging di cellule vive e la microscopia a super-risoluzione, fornendo approfondimenti dinamici sul comportamento del complesso del poro nucleare (NPC) e sui meccanismi di importazione ed esportazione delle cellule attraverso l'involucro nucleare.

Il gene NUP96, che codifica un componente cruciale della NPC, è fondamentale per il trasporto nucleocitoplasmatico. L'alterazione di NUP96 può influenzare non solo i meccanismi di trasporto, ma anche l'architettura e la funzione nucleare complessiva. Questa linea cellulare funge quindi da modello eccellente per studiare le patologie legate alla NPC e il ruolo del trasporto nucleare nel metabolismo e nella segnalazione cellulare. L'integrazione di mMaple in NUP96 consente il tracciamento e la visualizzazione in tempo reale delle dinamiche di NUP96, rendendolo uno strumento indispensabile per i ricercatori che si occupano di studi sul nucleo cellulare e per quelli che esplorano le implicazioni delle disfunzioni della NPC in malattie come il cancro e le infezioni virali.

Come strumento specializzato, il clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple n.16 supporta l'imaging ad alta risoluzione e fornisce dati sostanziali sulla distribuzione spaziale e temporale dei componenti della NPC. È particolarmente prezioso per gli esperimenti che richiedono un'analisi dettagliata dell'espressione genica, della localizzazione delle proteine e del trasporto nucleare in condizioni fisiologiche e patologiche, facilitando una comprensione più approfondita dei processi cellulari a livello molecolare.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia