U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP è una linea cellulare geneticamente modificata di osteosarcoma derivata dalla linea cellulare umana U-2 OS. Questa linea cellulare è stata ingegnerizzata attraverso l'editing del genoma mediato da CRISPR/Cas9 per incorporare un SNAP-tag al gene NUP96, consentendo la visualizzazione e lo studio delle dinamiche del complesso dei pori nucleari. I complessi dei pori nucleari (NPC) sono cruciali per la regolazione del trasporto nucleocitoplasmatico e NUP96 è un componente significativo dell'NPC, svolgendo un ruolo centrale nella sua integrità strutturale e nella sua funzione.

Nel clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP n.33, l'integrazione dell'etichetta SNAP al locus NUP96 consente l'attacco specifico e covalente di substrati fluorescenti o altre sonde chimiche che possono essere utilizzate per l'imaging di cellule vive e altri saggi biochimici. Questa caratteristica la rende uno strumento prezioso per lo studio delle dinamiche molecolari del trasporto nucleocitoplasmatico, per la comprensione delle patologie legate alla NPC e per lo screening di composti terapeutici che influenzano la funzione della NPC. La linea cellulare mantiene inoltre le caratteristiche della linea parentale U-2 OS, tra cui un elevato livello di stabilità genetica e facilità di coltura, che la rendono adatta per lo screening ad alta produttività e per studi estesi di biologia cellulare.

Grazie alla specificità della modifica del gene NUP96, il clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP n.33 rappresenta un modello unico per lo studio dettagliato dei componenti della NPC nel contesto della funzione e della disfunzione cellulare. I ricercatori possono sfruttare il sistema SNAP-tag per etichettare selettivamente e rapidamente NUP96, facilitando la visualizzazione in tempo reale delle dinamiche delle NPC in condizioni fisiologiche e patologiche. Questo clone specifico può fungere da solida piattaforma per la ricerca di base e gli studi biomedici applicati, contribuendo in modo significativo ai campi della biologia cellulare, della genetica e dell'oncologia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia