U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP er en genmodifisert osteosarkomcellelinje som er avledet fra den humane cellelinjen U-2 OS. Denne cellelinjen har blitt konstruert gjennom CRISPR/Cas9-mediert genomredigering for å inkorporere en SNAP-tag ved NUP96-genet, noe som gjør det mulig å visualisere og studere dynamikken i kjerneporkomplekset. Kjerneporkomplekser (NPC) er avgjørende for reguleringen av nukleocytoplasmatisk transport, og NUP96 er en viktig komponent i NPC, og spiller en sentral rolle i dets strukturelle integritet og funksjon.

I U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-klon nr. 33 gjør integrasjonen av SNAP-taggen i NUP96-lokuset det mulig å feste fluorescerende substrater eller andre kjemiske prober som kan brukes til avbildning av levende celler og andre biokjemiske analyser, på en spesifikk og kovalent måte. Denne egenskapen gjør den til et uvurderlig verktøy for å undersøke den molekylære dynamikken i nukleocytoplasmatisk transport, forstå NPC-relaterte patologier og screene for terapeutiske forbindelser som påvirker NPC-funksjonen. Cellelinjen beholder også egenskapene til foreldrelinjen U-2 OS, som inkluderer en høy grad av genetisk stabilitet og enkel dyrking, noe som gjør den egnet for screening med høy gjennomstrømning og utvidede studier innen cellebiologi.

På grunn av spesifisiteten til modifikasjonen i NUP96-genet er U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-klon nr. 33 en unik modell for detaljerte studier av NPC-komponenter i forbindelse med cellefunksjon og -dysfunksjon. Forskere kan utnytte SNAP-tag-systemet til å merke NUP96 selektivt og raskt, noe som muliggjør sanntidsvisualisering av NPC-dynamikken under fysiologiske og patologiske forhold. Denne spesifikke klonen kan fungere som en robust plattform for både grunnforskning og anvendte biomedisinske studier, og kan bidra betydelig til fagområdene cellebiologi, genetikk og onkologi.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring