U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

La lignée cellulaire U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP est une lignée cellulaire d'ostéosarcome génétiquement modifiée, dérivée de la lignée cellulaire humaine U-2 OS parentale. Cette lignée cellulaire a été modifiée par édition du génome à l'aide de CRISPR/Cas9 afin d'incorporer une étiquette SNAP au niveau du gène NUP96, ce qui permet de visualiser et d'étudier la dynamique du complexe du pore nucléaire. Les complexes du pore nucléaire (CPN) sont essentiels à la régulation du transport nucléocytoplasmique, et NUP96 est un composant important du CPN, jouant un rôle central dans son intégrité structurelle et sa fonction.

Dans le clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP n° 33, l'intégration de l'étiquette SNAP au locus NUP96 permet la fixation spécifique et covalente de substrats fluorescents ou d'autres sondes chimiques qui peuvent être utilisés pour l'imagerie des cellules vivantes et d'autres essais biochimiques. Cette caractéristique en fait un outil précieux pour l'étude de la dynamique moléculaire du transport nucléocytoplasmique, la compréhension des pathologies liées aux CPN et le criblage de composés thérapeutiques affectant la fonction des CPN. La lignée cellulaire conserve également les caractéristiques de la lignée cellulaire parentale U-2 OS, notamment un haut niveau de stabilité génétique et une grande facilité de culture, ce qui la rend adaptée au criblage à haut débit et aux études approfondies en biologie cellulaire.

En raison de la spécificité de la modification au niveau du gène NUP96, le clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP no.33 constitue un modèle unique pour l'étude détaillée des composants du NPC dans le contexte de la fonction et du dysfonctionnement cellulaires. Les chercheurs peuvent exploiter le système SNAP-tag pour marquer sélectivement et rapidement NUP96, facilitant ainsi la visualisation en temps réel de la dynamique du NPC dans des conditions physiologiques et pathologiques. Ce clone spécifique peut servir de plateforme robuste pour la recherche fondamentale et les études biomédicales appliquées, contribuant de manière significative aux domaines de la biologie cellulaire, de la génétique et de l'oncologie.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie