U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

Die U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP ist eine genetisch veränderte Osteosarkom-Zelllinie, die von der humanen Stammzelllinie U-2 OS abgeleitet ist. Diese Zelllinie wurde durch CRISPR/Cas9-vermittelte Genom-Editierung so verändert, dass sie einen SNAP-Tag am NUP96-Gen enthält, was die Visualisierung und Untersuchung der Dynamik des Kernporenkomplexes ermöglicht. Kernporenkomplexe (NPC) sind für die Regulierung des nukleozytoplasmatischen Transports von entscheidender Bedeutung, und NUP96 ist ein wichtiger Bestandteil des NPC und spielt eine zentrale Rolle für dessen strukturelle Integrität und Funktion.

Der U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-Klon Nr. 33 ermöglicht durch die Integration des SNAP-Tags am NUP96-Lokus die spezifische und kovalente Bindung von fluoreszierenden Substraten oder anderen chemischen Sonden, die für die Bildgebung in lebenden Zellen und andere biochemische Tests verwendet werden können. Diese Eigenschaft macht sie zu einem unschätzbaren Werkzeug für die Untersuchung der molekularen Dynamik des nukleozytoplasmatischen Transports, das Verständnis von NPC-bezogenen Pathologien und das Screening nach therapeutischen Wirkstoffen, die die NPC-Funktion beeinflussen. Die Zelllinie behält auch die Eigenschaften der elterlichen U-2 OS-Linie bei, darunter ein hohes Maß an genetischer Stabilität und eine einfache Kultivierung, wodurch sie sich für Hochdurchsatz-Screening und erweiterte zellbiologische Studien eignet.

Aufgrund der Spezifität der Modifikation am NUP96-Gen ist der U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-Klon Nr. 33 ein einzigartiges Modell für die detaillierte Untersuchung von NPC-Komponenten im Zusammenhang mit zellulären Funktionen und Dysfunktionen. Forscher können das SNAP-Tag-System nutzen, um NUP96 selektiv und schnell zu markieren, was die Echtzeit-Visualisierung der NPC-Dynamik unter physiologischen und pathologischen Bedingungen ermöglicht. Dieser spezifische Klon kann als robuste Plattform sowohl für die Grundlagenforschung als auch für angewandte biomedizinische Studien dienen und einen wichtigen Beitrag zu den Bereichen Zellbiologie, Genetik und Onkologie leisten.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung