U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP הוא קו תאים של אוסטאוסרקומה מהונדס גנטית, שמקורו בקו התאים האנושי U-2 OS. קו תאים זה הונדס באמצעות עריכת גנום בתיווך CRISPR/Cas9 כדי לשלב תג SNAP בגן NUP96, מה שמאפשר הדמיה וחקירה של הדינמיקה של קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות. קומפלקסים של נקבוביות גרעיניות (NPC) חיוניים לוויסות הובלת חומרים בין הגרעין לציטופלזמה, ו-NUP96 הוא מרכיב משמעותי ב-NPC, הממלא תפקיד מרכזי בשלמותו המבנית ובתפקודו.

בשיבוט U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP מס' 33, שילוב התג SNAP בלוקוס NUP96 מאפשר חיבור ספציפי וקובלנטי של מצעים פלואורסצנטיים או גלאים כימיים אחרים, שניתן להשתמש בהם להדמיה של תאים חיים ולבדיקות ביוכימיות אחרות. תכונה זו הופכת אותו לכלי יקר ערך לחקר הדינמיקה המולקולרית של הובלה גרעינית-ציטופלזמית, להבנת פתולוגיות הקשורות ל-NPC ולסינון תרכובות טיפוליות המשפיעות על תפקוד ה-NPC. קו התאים שומר גם על המאפיינים של קו ה-U-2 OS ההורי, הכוללים רמה גבוהה של יציבות גנטית וקלות גידול, מה שהופך אותו מתאים לסינון תפוקה גבוהה ולמחקרים ממושכים בביולוגיה תאית.

בשל הספציפיות של השינוי בגן NUP96, U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP clone no.33 מספק מודל ייחודי למחקר מפורט של רכיבי NPC בהקשר של תפקוד ותפקוד לקוי של התא. חוקרים יכולים לנצל את מערכת SNAP-tag כדי לסמן באופן סלקטיבי ומהיר את NUP96, מה שמאפשר הדמיה בזמן אמת של הדינמיקה של NPC בתנאים פיזיולוגיים ופתולוגיים. שיבוט ספציפי זה יכול לשמש כפלטפורמה איתנה הן למחקר בסיסי והן למחקרים ביו-רפואיים יישומיים, ותורם באופן משמעותי לתחומי הביולוגיה התאית, הגנטיקה והאונקולוגיה.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו