U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP on geneettisesti muunnettu osteosarkoomasolulinja, joka on johdettu ihmisen kantasolulinjasta U-2 OS. Tämä solulinja on muokattu CRISPR/Cas9-välitteisen genomimuokkauksen avulla siten, että se sisältää SNAP-tagin NUP96-geeniin, mikä mahdollistaa ydinhuokoskompleksin dynamiikan visualisoinnin ja tutkimisen. Ydinhuokoskompleksit (Nuclear Pore Complexes, NPC) ovat ratkaisevan tärkeitä nukleosytoplasmisen kuljetuksen säätelyssä, ja NUP96 on merkittävä osa NPC:tä, ja sillä on keskeinen rooli sen rakenteellisessa eheydessä ja toiminnassa.

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-kloonissa nro 33 SNAP-tagin integrointi NUP96-paikalle mahdollistaa fluoresoivien substraattien tai muiden kemiallisten koettimien spesifisen ja kovalenttisen kiinnittymisen, jota voidaan käyttää elävien solujen kuvantamiseen ja muihin biokemiallisiin määrityksiin. Tämä ominaisuus tekee siitä korvaamattoman arvokkaan välineen, jolla voidaan tutkia nukleosytoplasmisen kuljetuksen molekyylidynamiikkaa, ymmärtää NPC:hen liittyviä patologioita ja seuloa terapeuttisia yhdisteitä, jotka vaikuttavat NPC:n toimintaan. Solulinja säilyttää myös vanhemman U-2 OS -linjan ominaisuudet, joihin kuuluvat korkea geneettinen stabiilisuus ja helppo viljeltävyys, joten se soveltuu korkean läpimenon seulontaan ja laajoihin solubiologisiin tutkimuksiin.

NUP96-geenin modifikaation spesifisyyden ansiosta U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-klooni nro 33 tarjoaa ainutlaatuisen mallin NPC:n komponenttien yksityiskohtaiseen tutkimiseen solujen toiminnan ja toimintahäiriöiden yhteydessä. Tutkijat voivat hyödyntää SNAP-tag-järjestelmää NUP96:n selektiiviseen ja nopeaan merkitsemiseen, mikä helpottaa NPC-dynamiikan reaaliaikaista visualisointia fysiologisissa ja patologisissa olosuhteissa. Tämä erityinen klooni voi toimia vankkana alustana sekä perustutkimukselle että soveltaville biolääketieteellisille tutkimuksille ja edistää merkittävästi solubiologian, genetiikan ja onkologian aloja.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa