U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP
Cell line · Preces numurs 300444
U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP ir ģenētiski modificēta osteosarkomas šūnu līnija, kas iegūta no sākotnējās cilvēka šūnu līnijas U-2 OS. Šī šūnu līnija ir ģenētiski modificēta...
Pielāgošana / Ieteikumi
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAPCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP ir ģenētiski modificēta osteosarkomas šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka cilmes U-2 OS šūnu līnijas. Šī šūnu līnija ir pārveidota, izmantojot CRISPR/Cas9 mediētu genoma rediģēšanu, iekļaujot NUP96 gēnu ar SNAP marķējumu, kas ļauj vizualizēt un pētīt kodola poru kompleksa dinamiku. Kodola poru kompleksiem (NPC) ir izšķiroša nozīme nukleoplazmas transporta regulēšanā, un NUP96 ir nozīmīga NPC sastāvdaļa, kurai ir izšķiroša nozīme tā strukturālajā integritātē un funkcijās.
U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP klona Nr. 33 U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP klona Nr. 33 SNAP marķējuma integrācija NUP96 lokusā ļauj specifiski un kovalentā veidā pievienot fluorescējošus substrātus vai citas ķīmiskas zondes, ko var izmantot dzīvu šūnu attēlveidošanai un citiem bioķīmiskiem testiem. Šī īpašība padara to par nenovērtējamu rīku nukleocitoplazmas transporta molekulārās dinamikas izpētei, ar NPC saistītu patoloģiju izpratnei un terapeitisko savienojumu, kas ietekmē NPC funkciju, skrīningam. Šūnu līnija saglabā arī vecāku U-2 OS līnijas īpašības, kas ietver augstu ģenētiskās stabilitātes līmeni un ērtu kultivēšanu, padarot to piemērotu augstas veiktspējas skrīningam un plašākiem pētījumiem šūnu bioloģijā.
Pateicoties modifikācijas specifiskumam NUP96 gēnā, U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP klons Nr. 33 ir unikāls modelis detalizētai NPC komponentu izpētei šūnu funkciju un disfunkcijas kontekstā. Pētnieki var izmantot SNAP marķēšanas sistēmu, lai selektīvi un ātri marķētu NUP96, atvieglojot NPC dinamikas vizualizāciju reāllaikā fizioloģiskos un patoloģiskos apstākļos. Šis īpašais klons var kalpot kā stabila platforma gan fundamentāliem pētījumiem, gan lietišķiem biomedicīnas pētījumiem, sniedzot nozīmīgu ieguldījumu šūnu bioloģijas, ģenētikas un onkoloģijas jomās.
- Audums
- Bone
- Slimība
- Osteosarkoma
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP, clone 33) contains a CRISPR-engineered NUP96-SNAP fusion facilitating SNAP-tag chemical labeling of nuclear pores. The modification is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Identifikatori
- Atsauce
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP (Cytion kataloga numurs 300444)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FL
- noguldītājs
- Ellenberga laboratorija (EMBL)
04Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- NUP96-SNAP (kodola poru kompleksa olbaltumviela 96, SNAP birka)
05Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS, 3,0 g/l glikozes, stabilu glutamīnu, 2,0 mM nātrija piruvāta, 2,2 g/l NaHCO3, 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
07Ziedotājs
- Donora vecums
- 15 gadi
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
08Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Tiek piemēroti līgumi ar trešajām personām
- Jā
.jpg)

.jpg)

.jpg)

.jpg)
