U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP šūnas

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP ir ģenētiski modificēta šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka osteosarkomas U-2 OS cilmes līnijas. Šajā šūnu līnijā NUP96 gēna lokusā ir mērķtiecīgi ievietota monomēra uzlabota zaļā fluorescējošā proteīna (mEGFP) marķierzīme, kas iegūta, izmantojot CRISPR-Cas9 gēnu rediģēšanas tehnoloģiju. NUP96, kas ir daļa no kodola poru kompleksa, ir būtisks kodola transportam, un tā saplūšana ar mEGFP ļauj reāllaikā vizualizēt kodola poru dinamiku fluorescences mikroskopijā, sniedzot vērtīgu ieskatu par kodola transporta mehānismiem un nukleocitoplazmas apriti.

Šis īpašais klons ar numuru 195 ir atlasīts, lai nodrošinātu stabilu NUP96-mEGFP saplūšanas proteīna ekspresiju un saglabātu U-2 OS līnijai raksturīgās īpašības, tostarp spēcīgu citoskeleta struktūru, kas ir ļoti svarīga pētījumos saistībā ar vēža šūnu migrāciju un metastāzēm. CRISPR tehnoloģijas izmantošana nodrošina precīzu gēnu rediģēšanu, līdz minimumam samazinot blakussaskares efektus, kas varētu apdraudēt eksperimenta rezultātu integritāti. Tāpēc U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP klons Nr. 195 ir īpaši noderīgs augstas izšķirtspējas attēlveidošanas metodēm un detalizētiem šūnu arhitektūras pētījumiem, kas palīdz veikt progresīvus pētījumus šūnu bioloģijā, vēža izpētē un kodola transporta parādībās.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu