Celice U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP je gensko spremenjena celična linija, ki izhaja iz matične linije človeškega osteosarkoma U-2 OS. Ta celična linija vključuje ciljno vstavitev oznake monomernega izboljšanega zelenega fluorescentnega proteina (mEGFP) na lokus gena NUP96, kar je bilo doseženo s tehnologijo genskega urejanja CRISPR-Cas9. NUP96, ki je del kompleksa jedrnih por, je bistvenega pomena za jedrski transport, njegova fuzija z mEGFP pa omogoča vizualizacijo dinamike jedrskih por v realnem času pod fluorescenčnim mikroskopom, kar zagotavlja dragocen vpogled v mehanizme jedrskega transporta in nukleocitoplazemskega prometa.

Ta posebni klon, oštevilčen s številko 195, je bil izbran zaradi stabilnega izražanja fuzijskega proteina NUP96-mEGFP in ohranja tipične značilnosti linije U-2 OS, vključno z močno citoskeletno strukturo, ki je ključna pri študijah, povezanih z migracijo in metastaziranjem rakavih celic. Uporaba tehnologije CRISPR zagotavlja natančno urejanje genov in zmanjšuje učinke izven cilja, ki bi lahko ogrozili celovitost rezultatov poskusov. Zato je klon U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP št. 195 še posebej uporaben za tehnike slikanja z visoko ločljivostjo in podrobne študije celične arhitekture, kar pomaga pri naprednih raziskavah na področju celične biologije, raziskav raka in pojavov jedrskega transporta.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo