U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP-celler

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP er en genmodifisert cellelinje avledet fra den humane osteosarkomlinjen U-2 OS. Denne cellelinjen inneholder en målrettet innsetting av det monomere Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP)-taggen ved NUP96-genet, oppnådd ved hjelp av CRISPR-Cas9-genredigeringsteknologien. NUP96, som er en del av kjerneporekomplekset, er essensielt for kjernetransport, og fusjonen med mEGFP gjør det mulig å visualisere kjerneporedynamikken i sanntid ved hjelp av fluorescerende mikroskopi, noe som gir verdifull innsikt i mekanismer for kjernetransport og nukleocytoplasmatisk trafficking.

Denne spesifikke klonen, nummer 195, er valgt ut på grunn av sitt stabile uttrykk av NUP96-mEGFP-fusjonsproteinet og opprettholder de typiske egenskapene til U-2 OS-linjen, inkludert en robust cytoskjelettstruktur som er avgjørende i studier knyttet til kreftcellemigrasjon og metastase. Bruken av CRISPR-teknologi sikrer presis genredigering, noe som minimerer off-target-effekter som kan svekke integriteten til de eksperimentelle resultatene. Dette gjør U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP klon nr. 195 spesielt nyttig for høyoppløselige avbildningsteknikker og detaljerte studier av cellearkitektur, noe som bidrar til avansert forskning innen cellebiologi, kreftforskning og nukleære transportfenomener.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring