Bunky U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP
Cell line · Číslo výrobku 300174
U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP je geneticky modifikovaná bunková línia odvodená od materskej línie U-2 OS ľudského osteosarkómu. Táto bunková línia obsahuje ta...
Prispôsobenie / Odporúčania
- Bunky U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFPCell line€800.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP je geneticky modifikovaná bunková línia odvodená od materskej línie ľudského osteosarkómu U-2 OS. Táto bunková línia obsahuje cielenú inzerciu monomérneho zosilneného zeleného fluorescenčného proteínu (mEGFP) do lokusu génu NUP96, ktorá sa dosiahla pomocou technológie úpravy génov CRISPR-Cas9. NUP96, súčasť komplexu jadrových pórov, je nevyhnutný pre jadrový transport a jeho fúzia s mEGFP umožňuje vizualizáciu dynamiky jadrových pórov v reálnom čase pod fluorescenčným mikroskopom, čo poskytuje cenné poznatky o mechanizmoch jadrového transportu a nukleocytoplazmatickej dopravy.
Tento špecifický klon s číslom 195 bol vybraný pre stabilnú expresiu fúzneho proteínu NUP96-mEGFP a zachováva si typické vlastnosti línie U-2 OS vrátane robustnej cytoskeletálnej štruktúry, ktorá je rozhodujúca pri štúdiách týkajúcich sa migrácie a metastázovania rakovinových buniek. Použitie technológie CRISPR zabezpečuje presnú úpravu génov, čím sa minimalizujú necieľové účinky, ktoré by mohli ohroziť integritu experimentálnych výsledkov. Vďaka tomu je klon U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP č. 195 obzvlášť užitočný na zobrazovacie techniky s vysokým rozlíšením a podrobné štúdie bunkovej architektúry, čo napomáha pokročilému výskumu v oblasti bunkovej biológie, výskumu rakoviny a javov jadrového transportu.
- Tkanivo
- Kosti
- Choroba
- Osteosarkóm
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Žena
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o štatúte GMO
- GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP, clone 195) contains a CRISPR-engineered NUP96-mEGFP fusion introduced via lentiviral delivery, enabling fluorescent tracking of nuclear pore complexes. The modification is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelu podobné
04Identifikátory
- Citácia
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP klon č. 195 (číslo katalógu Cytion 300174)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FJ
- Vkladateľ
- Ellenbergova laboratória (EMBL)
05Prejav a náchylnosť
- Expresia proteínov
- MEGFP (proteín jadrového pórového komplexu 96, označený mEGFP)
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilný glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS, 1% NEAA
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 2 až 3 x 104 buniek/cm2
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- 15 rokov
- Etnická príslušnosť
- Kaukazský
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Platia zmluvy s tretími stranami
- Áno


.jpg)
.jpg)
.jpg)

.jpg)
