U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP-celler

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP er en genetisk modificeret cellelinje, der stammer fra den humane osteosarkom U-2 OS-forældrelinje. Denne cellelinje indeholder en målrettet indsættelse af det monomere Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP)-tag ved NUP96-genet, opnået ved hjælp af CRISPR-Cas9-genredigeringsteknologien. NUP96, der er en del af kerneporekomplekset, er afgørende for nuklear transport, og dets fusion med mEGFP giver mulighed for realtidsvisualisering af kerneporedynamik under fluorescerende mikroskopi, hvilket giver værdifuld indsigt i nukleare transportmekanismer og nukleocytoplasmatisk handel.

Denne specifikke klon, nummereret 195, er blevet udvalgt for sit stabile udtryk af NUP96-mEGFP-fusionsproteinet og opretholder de typiske egenskaber ved U-2 OS-afstamningen, herunder en robust cytoskeletal struktur, som er kritisk i undersøgelser relateret til kræftcellemigration og metastase. Anvendelsen af CRISPR-teknologi sikrer præcis genredigering og minimerer off-target-effekter, som kan kompromittere integriteten af de eksperimentelle resultater. Dette gør U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP klon nr. 195 særligt nyttig til billeddannelsesteknikker med høj opløsning og detaljerede studier af cellearkitektur, hvilket hjælper med avanceret forskning i cellebiologi, kræftforskning og nukleare transportfænomener.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring