U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP er en genetisk modificeret osteosarkomcellelinje, der stammer fra den humane U-2 OS-cellelinje. Denne cellelinje er blevet konstrueret gennem CRISPR/Cas9-medieret genomredigering for at inkorporere et SNAP-tag ved NUP96-genet, hvilket muliggør visualisering og undersøgelse af nukleare porekompleksers dynamik. Kerneporekomplekser (NPC'er) er afgørende for reguleringen af nukleocytoplasmatisk transport, og NUP96 er en væsentlig komponent i NPC'en, der spiller en central rolle i dens strukturelle integritet og funktion.

I U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP klon nr. 33 giver integrationen af SNAP-tagget i NUP96 locus mulighed for specifik og kovalent fastgørelse af fluorescerende substrater eller andre kemiske prober, der kan bruges til live-celle billeddannelse og andre biokemiske analyser. Denne funktion gør den til et uvurderligt værktøj til at undersøge den molekylære dynamik i nukleocytoplasmatisk transport, forstå NPC-relaterede patologier og screene for terapeutiske forbindelser, der påvirker NPC-funktionen. Cellelinjen bevarer også egenskaberne ved forældrelinjen U-2 OS, som omfatter en høj grad af genetisk stabilitet og nem dyrkning, hvilket gør den velegnet til screening med høj kapacitet og udvidede undersøgelser inden for cellebiologi.

På grund af modificeringens specificitet ved NUP96-genet giver U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-klon nr. 33 en unik model til detaljeret undersøgelse af NPC-komponenter i forbindelse med cellulær funktion og dysfunktion. Forskere kan udnytte SNAP-tag-systemet til selektivt og hurtigt at mærke NUP96, hvilket muliggør realtidsvisualisering af NPC-dynamik under fysiologiske og patologiske forhold. Denne specifikke klon kan fungere som en robust platform for både grundforskning og anvendte biomedicinske undersøgelser og bidrage væsentligt til områderne cellebiologi, genetik og onkologi.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring