U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAPは、親U-2 OSヒト細胞株由来の遺伝子改変骨肉腫細胞株である。この細胞株は、CRISPR/Cas9を介したゲノム編集により、NUP96遺伝子にSNAPタグを組み込むように操作されており、核膜孔複合体ダイナミクスの可視化と研究が可能である。核膜孔複合体（NPC）は核細胞質輸送の制御に極めて重要であり、NUP96はNPCの重要な構成要素であり、その構造的完全性と機能において極めて重要な役割を果たしている。

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAPクローンNo.33では、NUP96遺伝子座にSNAPタグを組み込むことで、ライブセルイメージングやその他の生化学的アッセイに使用できる蛍光基質やその他の化学プローブを特異的に共有結合させることができる。この特徴は、核細胞質内輸送の分子動態の研究、NPC関連病態の理解、NPC機能に影響を与える治療化合物のスクリーニングにとって、非常に貴重なツールとなる。この細胞株はまた、高い遺伝的安定性や培養の容易さなど、親株であるU-2 OS株の特徴を保持しており、細胞生物学におけるハイスループットスクリーニングや拡大研究に適している。

NUP96遺伝子における修飾の特異性により、U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAPクローンNo.33は、細胞機能と機能不全の文脈におけるNPC成分の詳細な研究のためのユニークなモデルとなる。研究者はSNAPタグシステムを利用してNUP96を選択的かつ迅速に標識することができ、生理学的および病理学的条件下でのNPC動態をリアルタイムで可視化することができる。この特異的クローンは、基礎研究と応用生物医学研究の両方のための強固なプラットフォームとして機能し、細胞生物学、遺伝学、腫瘍学の分野に大きく貢献する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。