U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP細胞

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFPは、ヒト骨肉腫U-2 OS親株に由来する遺伝子改変細胞株である。この細胞株は、CRISPR-Cas9遺伝子編集技術により、NUP96遺伝子座に単量体増強緑色蛍光タンパク質（mEGFP）タグを標的挿入したものである。核膜孔複合体の一部であるNUP96は核輸送に必須であり、mEGFPとの融合により、核膜孔の動態を蛍光顕微鏡下でリアルタイムに可視化することが可能となり、核輸送メカニズムや核細胞質内輸送に関する貴重な知見が得られる。

このクローンは、NUP96-mEGFP融合タンパク質の安定発現のために選択されたもので、がん細胞の移動と転移に関連する研究において重要な、強固な細胞骨格構造を含むU-2 OS系統の典型的な特徴を維持している。CRISPR技術の応用により、正確な遺伝子編集が保証され、実験結果の完全性を損なうオフターゲット効果を最小限に抑えることができる。このため、U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFPクローンNo.195は、高解像度イメージング技術や詳細な細胞構築研究に特に有用であり、細胞生物学、癌研究、核輸送現象などの先端研究に役立ちます。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。