U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP sejtek

Az U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP egy genetikailag módosított sejtvonal, amely a humán osteosarcoma U-2 OS szülővonalból származik. Ez a sejtvonal a monomerikus, fokozottan zöld fluoreszcens fehérje (mEGFP) címkének a NUP96 génlókuszba történő célzott beillesztését tartalmazza, amelyet a CRISPR-Cas9 génszerkesztési technológiával értek el. A nukleáris pórus komplex részét képező NUP96 a nukleáris transzporthoz elengedhetetlen, és a mEGFP-vel való fúziója lehetővé teszi a nukleáris pórus dinamikájának valós idejű vizualizálását fluoreszcens mikroszkópia segítségével, ami értékes betekintést nyújt a nukleáris transzportmechanizmusok és a nukleocitoplazmatikus kereskedelembe.

Ezt a 195-ös számmal jelölt klónt a NUP96-mEGFP fúziós fehérje stabil expressziója miatt választottuk ki, és fenntartja az U-2 OS vonal jellegzetes tulajdonságait, beleértve a robusztus citoszkeletális szerkezetet, amely kritikus fontosságú a rákos sejtek migrációjával és metasztázisával kapcsolatos vizsgálatokban. A CRISPR technológia alkalmazása biztosítja a pontos génszerkesztést, minimalizálva a célponton kívüli hatásokat, amelyek veszélyeztethetik a kísérleti eredmények integritását. Ez teszi az U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 195. számú klónt különösen hasznossá a nagy felbontású képalkotó technikák és a részletes sejtarchitektúra-vizsgálatok számára, segítve a sejtbiológia, a rákkutatás és a nukleáris transzport jelenségeinek fejlett kutatását.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban