U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP-cellen

De U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP is een genetisch gemodificeerde cellijn die is afgeleid van de menselijke osteosarcoom U-2 OS-ouderlijn. Deze cellijn bevat een doelgerichte invoeging van de monomere Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP)-tag in de NUP96-genlocus, bereikt met de CRISPR-Cas9-gen-bewerkingstechnologie. NUP96, onderdeel van het nucleaire poriecomplex, is essentieel voor nucleair transport en de fusie met mEGFP maakt real-time visualisatie van de dynamica van de nucleaire porie mogelijk onder fluorescentiemicroscopie, wat waardevolle inzichten oplevert in nucleaire transportmechanismen en nucleocytoplasmatische handel.

Deze specifieke kloon, genummerd 195, is geselecteerd vanwege de stabiele expressie van het fusie-eiwit NUP96-mEGFP en behoudt de typische kenmerken van de U-2 OS-lijn, waaronder een robuuste cytoskeletstructuur die cruciaal is in onderzoeken naar migratie en metastase van kankercellen. De toepassing van CRISPR-technologie zorgt voor nauwkeurige genbewerking en minimaliseert off-target effecten die de integriteit van de experimentele resultaten in gevaar zouden kunnen brengen. Dit maakt U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP kloon nr.195 bijzonder nuttig voor beeldvormingstechnieken met hoge resolutie en gedetailleerde studies van de cellulaire architectuur, wat bijdraagt aan geavanceerd onderzoek op het gebied van cellulaire biologie, kankeronderzoek en nucleaire transportverschijnselen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring