เซลล์ U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP เป็นสายเซลล์ที่ดัดแปลงพันธุกรรมซึ่งได้มาจากสายพันธุ์ต้นกำเนิด U-2 OS ของมะเร็งกระดูกชนิด osteosarcoma ในมนุษย์ สายเซลล์นี้มีการแทรกยีนของโปรตีนเรืองแสงสีเขียวชนิดโมโนเมอร์ Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP) เข้าไปที่ตำแหน่งของยีน NUP96 โดยใช้เทคโนโลยีการแก้ไขยีน CRISPR-Cas9NUP96 ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียร์ มีความสำคัญต่อการขนส่งภายในนิวเคลียส และการรวมตัวของมันกับ mEGFP ช่วยให้สามารถมองเห็นการเคลื่อนไหวของรูพรุนนิวเคลียร์ได้แบบเรียลไทม์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีค่าเกี่ยวกับกลไกการขนส่งภายในนิวเคลียสและการขนส่งระหว่างนิวเคลียสกับไซโตพลาซึม

โคลนเฉพาะนี้ หมายเลข 195 ได้รับการคัดเลือกเนื่องจากมีการแสดงออกของโปรตีนฟิวชั่น NUP96-mEGFP อย่างเสถียร และยังคงลักษณะเฉพาะของสายพันธุ์ U-2 OS ไว้ครบถ้วน รวมถึงโครงสร้างไซโตสเกเลตันที่แข็งแรง ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการเคลื่อนที่และการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งการประยุกต์ใช้เทคโนโลยี CRISPR ช่วยให้การแก้ไขยีนมีความแม่นยำสูง ลดผลกระทบที่อาจเกิดขึ้นนอกเป้าหมายซึ่งอาจส่งผลต่อความสมบูรณ์ของผลลัพธ์การทดลองได้ ซึ่งทำให้โคลน U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP หมายเลข 195 มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับเทคนิคการถ่ายภาพความละเอียดสูงและการศึกษาโครงสร้างเซลล์อย่างละเอียด ช่วยสนับสนุนการวิจัยขั้นสูงในด้านชีววิทยาเซลล์ การวิจัยมะเร็ง และปรากฏการณ์การขนส่งในนิวเคลียส

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.