U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP เป็นสายเซลล์มะเร็งกระดูกชนิด osteosarcoma ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรม มาจากสายเซลล์มนุษย์ U-2 OS ซึ่งเป็นสายเซลล์ต้นแบบ สายเซลล์นี้ถูกพัฒนาขึ้นโดยการแก้ไขจีโนมด้วยเทคโนโลยี CRISPR/Cas9 เพื่อเพิ่มแท็ก SNAP เข้าไปที่ยีน NUP96 ทำให้สามารถมองเห็นและศึกษาพลวัตของโครงสร้างรูพรุนในนิวเคลียสได้นิวเคลียร์พอร์คอมเพล็กซ์ (NPCs) มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการควบคุมการขนส่งนิวเคลียส-ไซโทพลาสซึม และ NUP96 เป็นองค์ประกอบที่สำคัญของ NPC ซึ่งมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งต่อความสมบูรณ์ทางโครงสร้างและการทำงานของมัน

ในโคลน U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP หมายเลข 33 การรวมตัวของแท็ก SNAP ที่ตำแหน่ง NUP96 ช่วยให้สามารถเชื่อมต่อสารเรืองแสงหรือสารเคมีอื่นๆ ได้เฉพาะเจาะจงและแบบโควาเลนต์ ซึ่งสามารถใช้สำหรับการถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิตและการทดสอบทางชีวเคมีอื่นๆคุณสมบัตินี้ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาพลวัตระดับโมเลกุลของการขนส่งระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาซึม, การเข้าใจโรคที่เกี่ยวข้องกับ NPC, และการคัดกรองสารบำบัดที่มีผลต่อการทำงานของ NPC สายเซลล์นี้ยังคงลักษณะของสายเซลล์ต้นกำเนิด U-2 OS ซึ่งรวมถึงระดับความเสถียรทางพันธุกรรมที่สูงและความง่ายในการเพาะเลี้ยง ทำให้เหมาะสำหรับการคัดกรองแบบผ่านสูงและการศึกษาในระยะยาวทางชีววิทยาของเซลล์

เนื่องจากความเฉพาะเจาะจงของการดัดแปลงที่บริเวณยีน NUP96 ทำให้โคลน U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP หมายเลข 33 เป็นแบบจำลองที่มีเอกลักษณ์สำหรับการศึกษาองค์ประกอบของ NPC อย่างละเอียดในบริบทของการทำงานและการทำงานผิดปกติของเซลล์นักวิจัยสามารถใช้ระบบ SNAP-tag เพื่อติดฉลาก NUP96 ได้อย่างเฉพาะเจาะจงและรวดเร็ว ซึ่งช่วยให้สามารถมองเห็นการเปลี่ยนแปลงของ NPC แบบเรียลไทม์ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยาและพยาธิสภาพได้ โคลนเฉพาะนี้สามารถทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่แข็งแกร่งสำหรับการวิจัยพื้นฐานและการศึกษาทางชีวการแพทย์ประยุกต์ ช่วยส่งเสริมวงการชีววิทยาเซลล์ พันธุศาสตร์ และมะเร็งวิทยาอย่างมีนัยสำคัญ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.