U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP je gensko spremenjena celična linija osteosarkoma, ki izhaja iz osnovne človeške celične linije U-2 OS. Ta celična linija je bila z urejanjem genoma s pomočjo CRISPR/Cas9 spremenjena tako, da je v gen NUP96 vključila oznako SNAP, kar omogoča vizualizacijo in preučevanje dinamike kompleksa jedrnih por. Kompleksi jedrskih por (NPC) so ključni za uravnavanje nukleocitoplazemskega transporta, NUP96 pa je pomembna sestavina NPC, ki ima ključno vlogo pri njegovi strukturni celovitosti in delovanju.

V klonu U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP št. 33 omogoča vključitev oznake SNAP v lokus NUP96 specifično in kovalentno pritrditev fluorescenčnih substratov ali drugih kemičnih sond, ki se lahko uporabljajo za slikanje živih celic in druge biokemične preskuse. Zaradi te lastnosti je to neprecenljivo orodje za raziskovanje molekularne dinamike nukleocitoplazemskega transporta, razumevanje patologij, povezanih z NPC, in iskanje terapevtskih spojin, ki vplivajo na delovanje NPC. Celična linija ohranja tudi značilnosti starševske linije U-2 OS, ki vključujejo visoko stopnjo genetske stabilnosti in enostavnost gojenja, zaradi česar je primerna za visoko zmogljivo presejanje in razširjene študije v celični biologiji.

Zaradi specifičnosti modifikacije na genu NUP96 je klon U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP št. 33 edinstven model za podrobno preučevanje komponent NPC v okviru celičnega delovanja in disfunkcije. Raziskovalci lahko izkoristijo sistem oznak SNAP za selektivno in hitro označevanje NUP96, kar omogoča vizualizacijo dinamike NPC v realnem času v fizioloških in patoloških pogojih. Ta specifični klon lahko služi kot robustna platforma za temeljne raziskave in uporabne biomedicinske študije ter pomembno prispeva k razvoju področij celične biologije, genetike in onkologije.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo