U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

إن U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP هو خط خلوي معدّل وراثياً من الساركوما العظمية مشتق من خط الخلايا البشرية U-2 OS الأم. وقد تمت هندسة هذا الخط الخلوي من خلال تعديل الجينوم بوساطة CRISPR/Cas9 لدمج علامة SNAP في جين NUP96، مما يتيح تصور ودراسة ديناميكيات مجمع المسام النووية. تُعدّ مجمعات المسام النووية (NPCs) حاسمة في تنظيم النقل النووي للبلازمية النووية، ويُعدّ NUP96 مكوناً مهماً في NPC، حيث يلعب دوراً محورياً في سلامته الهيكلية ووظيفته.

في استنساخ U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP رقم 33، يسمح دمج علامة SNAP في موضع NUP96 بالربط التساهمي المحدد والتساهمي للركائز الفلورية أو غيرها من المسابر الكيميائية التي يمكن استخدامها لتصوير الخلايا الحية وغيرها من الفحوصات الكيميائية الحيوية. هذه الميزة تجعلها أداة لا تقدر بثمن للتحقيق في الديناميكيات الجزيئية للنقل الخلوي الخلوي الخلوي وفهم الأمراض المرتبطة بالخلية العصبية النواة وفحص المركبات العلاجية التي تؤثر على وظيفة الخلية العصبية النواة. كما يحتفظ خط الخلية أيضًا بخصائص خط U-2 OS الأبوي، والتي تتضمن مستوى عالٍ من الاستقرار الوراثي وسهولة الاستزراع، مما يجعله مناسبًا للفحص عالي الإنتاجية والدراسات الموسعة في بيولوجيا الخلية.

ونظراً لخصوصية التعديل في جين NUP96، يوفر استنساخ U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP رقم 33 نموذجاً فريداً للدراسة التفصيلية لمكونات NPC في سياق الوظيفة الخلوية والخلل الوظيفي. يمكن للباحثين استغلال نظام علامة SNAP لتسمية NUP96 بشكل انتقائي وسريع، مما يسهل التصور في الوقت الحقيقي لديناميكيات NPC في ظل الظروف الفسيولوجية والمرضية. يمكن أن يكون هذا المستنسخ المحدد بمثابة منصة قوية لكل من البحوث الأساسية والدراسات الطبية الحيوية التطبيقية، مما يساهم بشكل كبير في مجالات البيولوجيا الخلوية وعلم الوراثة وعلم الأورام.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان