U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP
Cell line · Ürün numarası 300444
U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP, ana U-2 OS insan hücre hattından türetilmiş, genetik olarak modifiye edilmiş bir osteosarkom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, mühendislikle...
Kişiselleştirme / Öneriler
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAPCell line€800.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP, ana U-2 OS insan hücre hattından türetilen genetik olarak modifiye edilmiş bir osteosarkom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, CRISPR/Cas9 aracılı genom düzenleme yoluyla, NUP96 genine bir SNAP etiketi ekleyerek nükleer gözenek kompleksi dinamiklerinin görselleştirilmesini ve incelenmesini sağlayacak şekilde tasarlanmıştır. Nükleer gözenek kompleksleri (NPC'ler), nükleositoplazmik taşınmanın düzenlenmesi için çok önemlidir ve NUP96, NPC'nin önemli bir bileşenidir ve yapısal bütünlüğü ve işlevinde çok önemli bir rol oynar.
U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP klon no.33'te, SNAP etiketinin NUP96 lokusuna entegrasyonu, canlı hücre görüntüleme ve diğer biyokimyasal analizler için kullanılabilen floresan substratların veya diğer kimyasal probların spesifik ve kovalent bağlanmasına izin verir. Bu özellik onu nükleositoplazmik taşınmanın moleküler dinamiklerini araştırmak, NPC ile ilgili patolojileri anlamak ve NPC işlevini etkileyen terapötik bileşikleri taramak için paha biçilmez bir araç haline getirmektedir. Hücre hattı ayrıca, yüksek düzeyde genetik stabilite ve kültür kolaylığı içeren ebeveyn U-2 OS hattının özelliklerini koruyarak, hücre biyolojisinde yüksek verimli tarama ve genişletilmiş çalışmalar için uygun hale getirir.
NUP96 genindeki modifikasyonun özgüllüğü nedeniyle, U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP klon no.33, hücresel işlev ve işlev bozukluğu bağlamında NPC bileşenlerinin ayrıntılı çalışması için benzersiz bir model sağlar. Araştırmacılar, NUP96'yı seçici ve hızlı bir şekilde etiketlemek için SNAP-tag sisteminden faydalanarak fizyolojik ve patolojik koşullar altında NPC dinamiklerinin gerçek zamanlı görselleştirilmesini kolaylaştırabilir. Bu özel klon, hem temel araştırmalar hem de uygulamalı biyomedikal çalışmalar için sağlam bir platform görevi görebilir ve hücresel biyoloji, genetik ve onkoloji alanlarına önemli katkılar sağlayabilir.
- Doku
- Kemik
- Hastalık
- Osteosarkom
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Kadın
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- GDO durumu
- GMO-S1
- GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
- GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP, clone 33) contains a CRISPR-engineered NUP96-SNAP fusion facilitating SNAP-tag chemical labeling of nuclear pores. The modification is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP (Cytion katalog numarası 300444)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FL
- Mevduat sahibi
- Ellenberg Laboratuvarı (EMBL)
04İfade ve duyarlılık
- Protein ekspresyonu
- NUP96-SNAP (nükleer gözenek kompleksi proteini 96, SNAP-tag)
05İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- McCoys 5a, w: 3.0 g/L Glukoz, w: stabil Glutamin, w: 2.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820200a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS, 3,0 g/L Glukoz, stabil Glutamin, 2,0 mM Sodyum piruvat, 2,2 g/L NaHCO3, %1 NEAA ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Ekim yoğunluğu
- 1 x 104 hücre/cm2
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
07Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- 15 yıl
- Etnik köken
- Kafkas
08Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Üçüncü taraf sözleşmeleri geçerlidir
- Evet
.jpg)

.jpg)

.jpg)

.jpg)
