U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple, sağlam büyüme özellikleri ve çeşitli biyolojik çalışmalardaki faydasıyla bilinen insan U-2 OS hücre hattından türetilmiş, genetik olarak tasarlanmış bir osteosarkom hücre hattıdır. Bu özel klon, CRISPR/Cas9 gen düzenleme teknolojisi kullanılarak NUP96 genine foto-dönüştürülebilir bir floresan protein olan mMaple'ı dahil etmek üzere modifiye edilmiştir. MMaple proteini, canlı hücre görüntüleme ve süper çözünürlüklü mikroskopi gibi gelişmiş görüntüleme tekniklerine izin vererek nükleer gözenek kompleksi (NPC) davranışı ve nükleer zarf yoluyla hücresel ithalat-ihracat mekanizmaları hakkında dinamik bilgiler sağlar.

NPC'nin önemli bir bileşenini kodlayan NUP96 geni, nükleositoplazmik taşıma için hayati öneme sahiptir. NUP96'nın değiştirilmesi sadece taşıma mekanizmalarını değil, aynı zamanda genel nükleer mimariyi ve işlevi de etkileyebilir. Bu nedenle bu hücre hattı, NPC ile ilişkili patolojileri ve nükleer taşımanın hücresel metabolizma ve sinyalizasyondaki rolünü incelemek için mükemmel bir model olarak hizmet eder. MMaple'ın NUP96'ya entegrasyonu, NUP96 dinamiklerinin in vivo olarak gerçek zamanlı izlenmesine ve görselleştirilmesine izin vererek, hücre çekirdeği çalışmalarına odaklanan ve kanser ve viral enfeksiyonlar gibi hastalıklarda NPC işlev bozukluklarının etkilerini araştıran araştırmacılar için vazgeçilmez bir araç haline getirmektedir.

Özel bir araç olarak U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple klon no.16, yüksek çözünürlüklü görüntülemeyi destekler ve NPC bileşenlerinin uzamsal ve zamansal dağılımına ilişkin önemli veriler sağlar. Fizyolojik ve patolojik koşullar altında gen ifadesi, protein lokalizasyonu ve nükleer taşınmanın ayrıntılı analizini gerektiren deneyler için özellikle değerlidir ve moleküler düzeyde hücresel süreçlerin daha derinlemesine anlaşılmasını kolaylaştırır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın