U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMapleは、ヒトU-2 OS細胞株由来の遺伝子改変骨肉腫細胞株であり、その強固な増殖特性と様々な生物学的研究における有用性で知られている。このクローンは、CRISPR/Cas9遺伝子編集技術を用いて、光変換可能な蛍光タンパク質であるmMapleをNUP96遺伝子に組み込むように改変されている。mMapleタンパク質は、ライブセルイメージングや超解像顕微鏡などの高度なイメージング技術を可能にし、核膜を介した核膜孔複合体（NPC）の挙動や細胞の輸出入機構に関するダイナミックな知見を提供する。

NPCの重要な構成要素をコードするNUP96遺伝子は、核細胞質輸送に不可欠である。NUP96の変化は、輸送機構だけでなく、核の全体的な構造と機能にも影響を及ぼす可能性がある。したがってこの細胞株は、NPC関連の病態や、細胞代謝とシグナル伝達における核輸送の役割を研究するための優れたモデルとして役立つ。mMapleをNUP96に組み込むことで、NUP96の動態をin vivoでリアルタイムに追跡・可視化することが可能になり、細胞核研究に焦点をあてる研究者や、癌やウイルス感染などの疾患におけるNPC機能不全の意味を探求する研究者にとって不可欠なツールとなる。

特殊なツールとして、U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMapleクローンNo.16は高解像度イメージングをサポートし、NPC成分の空間的および時間的分布に関する実質的なデータを提供します。生理学的および病理学的条件下での遺伝子発現、タンパク質局在、核輸送の詳細な解析を必要とする実験に特に有用であり、分子レベルでの細胞プロセスのより深い理解を促進する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。