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U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
ティッシュ
骨
病気
骨肉腫

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · 製品番号 300294

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107細胞株は、広く使用されているヒト骨肉腫細胞株U-2 OSの特殊な変異株です。この特定のモデルは……

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01概要

説明

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107細胞株は、広く用いられているヒト骨肉腫細胞株U-2 OSの特殊な変異株である。この特殊なモデルは、核と細胞質間の分子輸送に不可欠な核膜孔複合体の極めて重要な構成要素であるヌクレオポリンNup107のSNAPタグ付きバージョンを発現するように操作されている。SNAPタグ技術の統合により、生細胞または固定細胞におけるNup107の生物学的直交標識と可視化が可能になり、生理的条件下での核細胞質輸送と核膜孔複合体構築を研究するための強力なツールとなる。

U-2 OSバックグランドは、頑健な増殖速度やよく特徴づけられた核型など、いくつかの利点を提供し、ハイスループットスクリーニングアプリケーションやゲノム研究をサポートする。この細胞株で使われているZFN(Zinc Finger Nuclease)技術は、標的ゲノム編集を容易にし、研究者が核輸送や他の細胞プロセスへの遺伝的寄与を調べる精度を高める。この細胞株は、癌生物学や細胞生理学における核膜孔複合体の動態や制御の解明を目的とした研究に特に有用である。

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294細胞株は特殊な性質を持つため、超解像顕微鏡を含む高度なイメージング技術に非常に適しており、ヌクレオポリン機能をこれまでにない詳細さで探索することができる。また、がんを含む様々な疾患に関与する核輸送経路を標的とした治療戦略を開発するための貴重なリソースでもある。SNAP-tagコンポーネントは、さらなる生化学的およびプロテオーム解析のための汎用性を付加し、細胞生物学および分子生物学の分野において不可欠なツールとなっている。

ティッシュ
骨
病気
骨肉腫

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03識別子

引用
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107(Cytion カタログ番号 300294)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_B7FM
預金者
エレンバーグ・ラボ(EMBL)

04発現と感受性

タンパク質の発現
SNAP-Nup107(核膜孔複合体タンパク質107, SNAPタグ)

05取り扱いと飼育

培地
McCoys 5a、w:3.0g/L グルコース、w:安定グルタミン、w:2.0mM ピルビン酸ナトリウム、w:2.2g/L NaHCO3 (Cytion article number 820200a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、3.0 g/Lグルコース、安定グルタミン、2.0 mMピルビン酸ナトリウム、2.2 g/L NaHCO3、1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
15年
民族
白人