Prejsť na obsah
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tkanivo
Kosti
Choroba
Osteosarkóm

Dokumenty

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Číslo výrobku 300294

Bunka U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 predstavuje špecializovanú variantu široko používaného ľudského osteosarkómového bunkového kmeňa U-2 OS. Tento konkrétny model bol...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 predstavuje špecializovaný variant široko používanej ľudskej osteosarkómovej bunkovej línie U-2 OS. Tento konkrétny model bol vytvorený tak, aby exprimoval SNAP-označenú verziu nukleoporínu Nup107, kľúčovú zložku komplexu jadrových pórov, ktorá je nevyhnutná pre transport molekúl medzi jadrom a cytoplazmou. Integrácia technológie SNAP-tag umožňuje biortogonálne značenie a vizualizáciu Nup107 v živých alebo fixovaných bunkách, čo poskytuje výkonný nástroj na štúdium nukleocytoplazmatického transportu a architektúry komplexu jadrových pórov za fyziologických podmienok.

Pozadie U-2 OS ponúka niekoľko výhod vrátane robustnej rýchlosti rastu a dobre charakterizovaného karyotypu, ktoré podporujú vysoko výkonné skríningové aplikácie a genomické štúdie. Technológia ZFN (Zinc Finger Nuclease) používaná v tejto bunkovej línii uľahčuje cielenú úpravu genómu, čím zvyšuje presnosť, s akou môžu výskumníci skúmať genetický prínos k jadrovému transportu a iným bunkovým procesom. Táto bunková línia je obzvlášť užitočná na štúdie zamerané na objasnenie dynamiky a regulácie komplexov jadrových pórov v biológii rakoviny a bunkovej fyziológii.

Vzhľadom na špecializovanú povahu bunkovej línie U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 č. 294 je veľmi vhodná na pokročilé zobrazovacie techniky vrátane mikroskopie so superrozlíšením na skúmanie funkcií nukleoporínov v nevídaných detailoch. Je tiež cenným zdrojom na vývoj terapeutických stratégií zameraných na jadrové transportné dráhy, ktoré sa podieľajú na rôznych ochoreniach vrátane rakoviny. Komponent SNAP-tag zvyšuje univerzálnosť ďalších biochemických a proteomických analýz, čím sa stáva nepostrádateľným nástrojom v oblasti bunkovej a molekulárnej biológie.

Tkanivo
Kosti
Choroba
Osteosarkóm

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (katalógové číslo Cytion 300294)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Vkladateľ
Ellenbergova laboratória (EMBL)

04Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
SNAP-Nup107 (proteín jadrového pórového komplexu 107, značka SNAP)

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilný glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 3,0 g/l glukózy, stabilný glutamín, 2,0 mM pyruvát sodný, 2,2 g/l NaHCO3, 1 % NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
15 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský