Μετάβαση στο περιεχόμενο
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Ιστός
Οστά
Ασθένεια
Οστεοσάρκωμα

Έγγραφα

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300294

Η κυτταρική σειρά U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 αποτελεί μια εξειδικευμένη παραλλαγή της ευρέως χρησιμοποιούμενης κυτταρικής σειράς U-2 OS του ανθρώπινου οστεοσαρκώματος. Αυτό το συγκεκριμένο μοντέλο έχει...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 αντιπροσωπεύει μια εξειδικευμένη παραλλαγή της ευρέως χρησιμοποιούμενης ανθρώπινης κυτταρικής σειράς οστεοσαρκώματος U-2 OS. Αυτό το συγκεκριμένο μοντέλο έχει κατασκευαστεί για να εκφράζει την έκδοση με ετικέτα SNAP της νουκλεοπορίνης Nup107, ένα βασικό συστατικό του συμπλόκου των πυρηνικών πόρων, το οποίο είναι απαραίτητο για τη μεταφορά μορίων μεταξύ του πυρήνα και του κυτταροπλάσματος. Η ενσωμάτωση της τεχνολογίας SNAP-tag επιτρέπει τη βιορθολογική σήμανση και οπτικοποίηση της Nup107 σε ζωντανά ή σταθερά κύτταρα, παρέχοντας ένα ισχυρό εργαλείο για τη μελέτη της πυρηνοκυτταροπλασματικής μεταφοράς και της αρχιτεκτονικής του συμπλόκου των πυρηνικών πόρων υπό φυσιολογικές συνθήκες.

Το υπόβαθρο U-2 OS προσφέρει αρκετά πλεονεκτήματα, συμπεριλαμβανομένων των ισχυρών ρυθμών ανάπτυξης και του καλά χαρακτηρισμένου καρυότυπου, τα οποία υποστηρίζουν εφαρμογές διαλογής υψηλής απόδοσης και γονιδιωματικές μελέτες. Η τεχνολογία ZFN (Zinc Finger Nuclease) που χρησιμοποιείται σε αυτή την κυτταρική σειρά διευκολύνει τη στοχευμένη επεξεργασία του γονιδιώματος, ενισχύοντας την ακρίβεια με την οποία οι ερευνητές μπορούν να διερευνήσουν τη γενετική συμβολή στην πυρηνική μεταφορά και σε άλλες κυτταρικές διεργασίες. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ιδιαίτερα χρήσιμη για μελέτες που αποσκοπούν στη διαλεύκανση της δυναμικής και της ρύθμισης των συμπλόκων των πυρηνικών πόρων στη βιολογία του καρκίνου και την κυτταρική φυσιολογία.

Λόγω της εξειδικευμένης φύσης της κυτταρικής σειράς U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294, είναι ιδιαίτερα κατάλληλη για προηγμένες τεχνικές απεικόνισης, συμπεριλαμβανομένης της μικροσκοπίας υπερ-ανάλυσης, για τη διερεύνηση των λειτουργιών της νουκλεοπορίνης με πρωτοφανή λεπτομέρεια. Αποτελεί επίσης πολύτιμο πόρο για την ανάπτυξη θεραπευτικών στρατηγικών που στοχεύουν σε μονοπάτια πυρηνικής μεταφοράς που εμπλέκονται σε διάφορες ασθένειες, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου. Το συστατικό SNAP-tag προσθέτει ευελιξία για περαιτέρω βιοχημικές και πρωτεομικές αναλύσεις, καθιστώντας το απαραίτητο εργαλείο στον τομέα της κυτταρικής και μοριακής βιολογίας.

Ιστός
Οστά
Ασθένεια
Οστεοσάρκωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Αναγνωριστικά

Παραπομπή
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (αριθμός καταλόγου Cytion 300294)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_B7FM
Καταθέτης
Εργαστήριο Ellenberg (EMBL)

04Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
SNAP-Nup107 (πρωτεΐνη του συμπλέγματος πυρηνικού πόρου 107, με ετικέτα SNAP)

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
McCoys 5a, w: 3,0 g/L γλυκόζη, w: σταθερή γλουταμίνη, w: 2,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 2,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820200a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 3,0 g/L γλυκόζη, σταθερή γλουταμίνη, 2,0 mM πυρουβικό νάτριο, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
15 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος