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U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tissu
Os
Maladie
Ostéosarcome

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U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Référence du produit 300294

La lignée cellulaire U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 est une variante spécialisée de la lignée cellulaire U-2 OS, largement utilisée, issue d'un ostéosarcome humain. Ce modèle particulier a été...

€800.00hors taxes et frais de port
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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 représente une variante spécialisée de la lignée cellulaire d'ostéosarcome humain U-2 OS, largement utilisée. Ce modèle particulier a été conçu pour exprimer la version marquée SNAP de la nucléoporine Nup107, un composant central du complexe du pore nucléaire, qui est essentiel pour le transport de molécules entre le noyau et le cytoplasme. L'intégration de la technologie SNAP-tag permet le marquage biorthogonal et la visualisation de Nup107 dans des cellules vivantes ou fixées, ce qui constitue un outil puissant pour étudier le transport nucléocytoplasmique et l'architecture du complexe du pore nucléaire dans des conditions physiologiques.

Le fond U-2 OS offre plusieurs avantages, notamment des taux de croissance robustes et un caryotype bien caractérisé, qui permettent des applications de criblage à haut débit et des études génomiques. La technologie ZFN (Zinc Finger Nuclease) utilisée dans cette lignée cellulaire facilite l'édition ciblée du génome, améliorant la précision avec laquelle les chercheurs peuvent étudier les contributions génétiques au transport nucléaire et à d'autres processus cellulaires. Cette lignée cellulaire est particulièrement utile pour les études visant à élucider la dynamique et la régulation des complexes du pore nucléaire dans la biologie du cancer et la physiologie cellulaire.

En raison de la nature spécialisée de la lignée cellulaire U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294, elle convient parfaitement aux techniques d'imagerie avancées, y compris la microscopie à super-résolution, pour explorer les fonctions des nucléoporines à un niveau de détail sans précédent. Elle constitue également une ressource précieuse pour le développement de stratégies thérapeutiques ciblant les voies de transport nucléaire impliquées dans diverses maladies, y compris le cancer. Le composant SNAP-tag ajoute de la polyvalence pour d'autres analyses biochimiques et protéomiques, ce qui en fait un outil indispensable dans le domaine de la biologie cellulaire et moléculaire.

Tissu
Os
Maladie
Ostéosarcome

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (numéro de catalogue Cytion 300294)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Déposant
Le laboratoire Ellenberg (EMBL)

04Expression et sensibilité

Expression des protéines
SNAP-Nup107 (protéine 107 du complexe du pore nucléaire, SNAP-tag)

05Manipulation et culture

Milieu de culture
McCoys 5a, w : 3.0 g/L Glucose, w : Glutamine stable, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820200a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 3,0 g/L de glucose, de la glutamine stable, 2,0 mM de pyruvate de sodium, 2,2 g/L de NaHCO3, 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
15 ans
Origine ethnique
Caucasien