Skip to content
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tissue
עצם
Disease
אוסטאוסרקומה

Documents

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Product number 300294

The U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 cell line represents a specialized variant of the widely used human osteosarcoma cell line U-2 OS. This particular model has be...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 מייצג גרסה מיוחדת של קו התאים U-2 OS, הנפוץ בשימוש לטיפול באוסטאוסרקומה אנושית. מודל זה תוכנן כך שיבטא את הגרסה המסומנת ב-SNAP של הנוקליופורין Nup107, מרכיב מרכזי במכלול הנקבוביות הגרעיניות, החיוני להעברת מולקולות בין הגרעין לציטופלסמה. שילוב טכנולוגיית SNAP-tag מאפשר סימון בי-אורתוגונלי והדמיה של Nup107 בתאים חיים או קבועים, ומספק כלי רב עוצמה לחקר הובלה גרעינית-ציטופלזמית וארכיטקטורת קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות בתנאים פיזיולוגיים.

רקע ה-U-2 OS מציע מספר יתרונות, כולל קצב גדילה יציב וקריוטיפ מאופיין היטב, התומכים ביישומים של סינון תפוקה גבוהה ובמחקרים גנומיים. טכנולוגיית ZFN (Zinc Finger Nuclease) המשמשת בקו תאים זה מאפשרת עריכת גנום ממוקדת, ומשפרת את הדיוק שבו חוקרים יכולים לחקור את התרומות הגנטיות להובלה גרעינית ולתהליכים תאיים אחרים. קו תאים זה שימושי במיוחד למחקרים שמטרתם להבהיר את הדינמיקה והוויסות של קומפלקסי נקבוביות גרעיניות בביולוגיה של הסרטן ובפיזיולוגיה התאית.

בשל האופי המיוחד של קו התאים U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294, הוא מתאים במיוחד לטכניקות הדמיה מתקדמות, כולל מיקרוסקופיה ברזולוציה גבוהה, כדי לחקור את תפקודי הנוקליופורין ברמת פירוט חסרת תקדים. הוא גם משאב יקר ערך לפיתוח אסטרטגיות טיפוליות המכוונות למסלולי הובלה גרעיניים המעורבים במחלות שונות, כולל סרטן. רכיב ה-SNAP-tag מוסיף גמישות לניתוחים ביוכימיים ופרוטאומיים נוספים, מה שהופך אותו לכלי חיוני בתחום הביולוגיה התאית והמולקולרית.

Tissue
עצם
Disease
אוסטאוסרקומה

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (מספר קטלוגי Cytion 300294)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Depositor
מעבדת אלנברג (EMBL)

04Expression and susceptibility

Protein expression
SNAP-Nup107 (חלבון מורכב נקבוביות גרעיניות 107, SNAP-tag)

05Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 3.0 גרם/ליטר גלוקוז, גלוטמין יציב, 2.0 מ"מ נתרן פירובט, 2.2 גרם/ליטר NaHCO3, 1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
15 שנים
Ethnicity
קווקזי