Skip to content
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tissue
Xương
Disease
U xương

Documents

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Product number 300294

The U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 cell line represents a specialized variant of the widely used human osteosarcoma cell line U-2 OS. This particular model has be...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 là một biến thể chuyên biệt của dòng tế bào ung thư xương người U-2 OS được sử dụng rộng rãi. Mô hình này đã được thiết kế để biểu hiện phiên bản có gắn SNAP-tag của nucleoporin Nup107, một thành phần quan trọng của phức hợp lỗ nhân, có vai trò thiết yếu trong quá trình vận chuyển phân tử giữa nhân và chất tế bào. Việc tích hợp công nghệ SNAP-tag cho phép đánh dấu và quan sát Nup107 trong tế bào sống hoặc cố định, cung cấp một công cụ mạnh mẽ để nghiên cứu vận chuyển nhân-chất tế bào và cấu trúc phức hợp lỗ nhân trong điều kiện sinh lý.

Nền tảng U-2 OS mang lại nhiều ưu điểm, bao gồm tốc độ tăng trưởng mạnh mẽ và bộ nhiễm sắc thể được đặc trưng rõ ràng, hỗ trợ các ứng dụng sàng lọc quy mô lớn và nghiên cứu gen. Công nghệ ZFN (Zinc Finger Nuclease) được sử dụng trong dòng tế bào này cho phép chỉnh sửa gen có mục tiêu, nâng cao độ chính xác trong việc nghiên cứu các đóng góp di truyền đối với vận chuyển nhân và các quá trình tế bào khác. Dòng tế bào này đặc biệt hữu ích cho các nghiên cứu nhằm làm sáng tỏ động học và điều hòa của phức hợp lỗ nhân trong sinh học ung thư và sinh lý học tế bào.

Do tính chất chuyên biệt của dòng tế bào U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294, nó rất phù hợp cho các kỹ thuật hình ảnh tiên tiến, bao gồm kính hiển vi siêu phân giải, để khám phá chức năng của nucleoporin với chi tiết chưa từng có. Nó cũng là một nguồn tài nguyên quý giá cho việc phát triển các chiến lược điều trị nhắm vào các con đường vận chuyển nhân liên quan đến các bệnh lý khác nhau, bao gồm ung thư. Thành phần SNAP-tag mang lại tính linh hoạt cho các phân tích sinh hóa và proteomics tiếp theo, khiến nó trở thành công cụ không thể thiếu trong lĩnh vực sinh học tế bào và phân tử.

Tissue
Xương
Disease
U xương

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Số catalog của Cytion: 300294)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Depositor
Phòng thí nghiệm Ellenberg (EMBL)

04Expression and susceptibility

Protein expression
SNAP-Nup107 (protein phức hợp lỗ hạt nhân 107, SNAP-tag)

05Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, chứa: 3,0 g/L glucose, chứa: glutamine ổn định, chứa: 2,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò (FBS), 3,0 g/L glucose, glutamine ổn định, 2,0 mM natri pyruvate, 2,2 g/L NaHCO₃, 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
15 năm
Ethnicity
Người da trắng