U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Cell line · Product number 300294
The U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 cell line represents a specialized variant of the widely used human osteosarcoma cell line U-2 OS. This particular model has be...
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01General information
- Description
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 細胞系是廣泛使用的人類骨肉瘤細胞系 U-2 OS 的一種特殊變體。 此特定模型經基因工程改造，可表達帶有 SNAP 標籤的核孔蛋白 Nup107；該蛋白是核孔複合體的關鍵組成部分，對於分子在細胞核與細胞質之間的運輸至關重要。 整合 SNAP 標籤技術，可對活細胞或固定細胞中的 Nup107 進行雙正交標記與可視化，為在生理條件下研究核質運輸及核孔複合體結構提供了強大的工具。
U-2 OS 細胞系背景具備多項優勢，包括穩健的生長速率及特徵明確的核型，有助於進行高通量篩選應用與基因組研究。 此細胞系所採用的 ZFN（鋅指核酸酶）技術，有助於進行靶向基因組編輯，提升研究人員探究基因對核轉運及其他細胞過程影響的精度。此細胞系對於旨在闡明癌症生物學與細胞生理學中核孔複合體動態及調控機制的研究尤為有用。
鑑於 U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294 細胞系的特殊性質，其極適合應用於先進成像技術（包括超解析度顯微鏡），以前所未有的細節探索核孔蛋白的功能。 此外，它也是開發針對與各種疾病（包括癌症）相關之核轉運途徑治療策略的寶貴資源。SNAP-tag 組件為後續的生化與蛋白質體學分析增添了多樣性，使其成為細胞與分子生物學領域中不可或缺的工具。
- Tissue
- 骨頭
- Disease
- 骨肉瘤
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107（Cytion 型號 300294）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FM
- Depositor
- 艾倫伯格實驗室（EMBL）
04Expression and susceptibility
- Protein expression
- SNAP-Nup107（核孔複合體蛋白 107，SNAP-tag）
05Handling and culture
- Culture medium
- 麥考伊 5a 培養基，含：3.0 g/L 葡萄糖，含：穩定型谷氨酰胺，含：2.0 mM 丙酮酸鈉，含：2.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820200a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS、3.0 g/L 葡萄糖、穩定型谷氨醯胺、2.0 mM 丙酮酸鈉、2.2 g/L NaHCO₃ 以及 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 15年
- Ethnicity
- 高加索人
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Third-party agreements apply
- Yes
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