İçeriğe atla
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Doku
Kemik
Hastalık
Osteosarkom

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Ürün numarası 300294

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 hücre hattı, yaygın olarak kullanılan insan osteosarkom hücre hattı U-2 OS’nin özel bir varyantını temsil etmektedir. Bu özel model...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 hücre hattı, yaygın olarak kullanılan insan osteosarkom hücre hattı U-2 OS'nin özel bir varyantını temsil eder. Bu özel model, çekirdek ve sitoplazma arasında moleküllerin taşınması için gerekli olan nükleer gözenek kompleksinin önemli bir bileşeni olan nükleoporin Nup107'nin SNAP etiketli versiyonunu ifade edecek şekilde tasarlanmıştır. SNAP-tag teknolojisinin entegrasyonu, Nup107'nin canlı veya sabit hücrelerde biyortogonal etiketlenmesine ve görselleştirilmesine olanak tanıyarak fizyolojik koşullar altında nükleositoplazmik taşıma ve nükleer gözenek kompleksi mimarisini incelemek için güçlü bir araç sağlar.

U-2 OS arka planı, yüksek verimli tarama uygulamalarını ve genomik çalışmaları destekleyen sağlam büyüme oranları ve iyi karakterize edilmiş bir karyotip dahil olmak üzere çeşitli avantajlar sunar. Bu hücre hattında kullanılan ZFN (Zinc Finger Nuclease) teknolojisi, hedeflenen genom düzenlemesini kolaylaştırarak araştırmacıların nükleer taşıma ve diğer hücresel süreçlere genetik katkıları araştırabilecekleri hassasiyeti artırır. Bu hücre hattı, kanser biyolojisi ve hücresel fizyolojide nükleer gözenek komplekslerinin dinamiklerini ve düzenlenmesini aydınlatmayı amaçlayan çalışmalar için özellikle yararlıdır.

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294 hücre hattının özel yapısı nedeniyle, nükleoporin işlevlerini benzeri görülmemiş ayrıntılarla keşfetmek için süper çözünürlüklü mikroskopi de dahil olmak üzere gelişmiş görüntüleme teknikleri için son derece uygundur. Ayrıca, kanser dahil çeşitli hastalıklarda rol oynayan nükleer taşıma yollarını hedef alan terapötik stratejiler geliştirmek için değerli bir kaynaktır. SNAP-tag bileşeni, daha ileri biyokimyasal ve proteomik analizler için çok yönlülük katarak onu hücresel ve moleküler biyoloji alanında vazgeçilmez bir araç haline getirir.

Doku
Kemik
Hastalık
Osteosarkom

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Cytion katalog numarası 300294)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Mevduat sahibi
Ellenberg Laboratuvarı (EMBL)

04İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
SNAP-Nup107 (nükleer gözenek kompleksi proteini 107, SNAP-tag)

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
McCoys 5a, w: 3.0 g/L Glukoz, w: stabil Glutamin, w: 2.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820200a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 3,0 g/L Glukoz, stabil Glutamin, 2,0 mM Sodyum piruvat, 2,2 g/L NaHCO3, %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
15 yıl
Etnik köken
Kafkas