Gå direkt till innehållet
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Vävnad
Ben
Sjukdom
Osteosarkom

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Produktnummer 300294

Cellinjen U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 är en specialiserad variant av den allmänt använda humana osteosarkomcellinjen U-2 OS. Denna specifika modell har...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 representerar en specialiserad variant av den allmänt använda humana osteosarkomcellinjen U-2 OS. Denna speciella modell har konstruerats för att uttrycka den SNAP-taggade versionen av nukleoporinet Nup107, en central komponent i kärnporskomplexet, som är avgörande för transporten av molekyler mellan kärnan och cytoplasman. Integrationen av SNAP-tag-tekniken möjliggör biorthogonal märkning och visualisering av Nup107 i levande eller fixerade celler, vilket ger ett kraftfullt verktyg för att studera nukleocytoplasmisk transport och kärnporskomplexets arkitektur under fysiologiska förhållanden.

U-2 OS-bakgrunden erbjuder flera fördelar, inklusive robusta tillväxthastigheter och en väl karakteriserad karyotyp, som stöder screeningapplikationer med hög genomströmning och genomiska studier. ZFN-tekniken (Zinc Finger Nuclease) som används i denna cellinje underlättar riktad genomredigering, vilket ökar den precision med vilken forskare kan undersöka de genetiska bidragen till kärntransport och andra cellulära processer. Denna cellinje är särskilt användbar för studier som syftar till att klargöra dynamiken och regleringen av kärnporskomplex inom cancerbiologi och cellulär fysiologi.

På grund av den specialiserade karaktären hos cellinjen U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294 är den mycket lämplig för avancerade avbildningstekniker, inklusive superupplösningsmikroskopi, för att utforska nukleoporinfunktioner med en detaljrikedom som aldrig tidigare skådats. Den är också en värdefull resurs för att utveckla terapeutiska strategier som riktar sig mot nukleära transportvägar som är inblandade i olika sjukdomar, inklusive cancer. SNAP-tag-komponenten ökar mångsidigheten för ytterligare biokemiska och proteomiska analyser, vilket gör den till ett oumbärligt verktyg inom cell- och molekylärbiologi.

Vävnad
Ben
Sjukdom
Osteosarkom

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Identifierare

Källa
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (Cytion katalognummer 300294)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Insättare
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

04Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
SNAP-Nup107 (kärnporskomplexprotein 107, SNAP-tagg)

05Hantering och odling

Odlingsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukos, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera med 10% FBS, 3,0 g/L glukos, stabil glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
15 år
Etnicitet
Kaukasisk