Přejít na obsah
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tkáň
Kost
Nemoc
Osteosarkom

Dokumenty

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Číslo výrobku 300294

Buněčná linie U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 představuje specializovanou variantu široce používané lidské osteosarkomové buněčné linie U-2 OS. Tento konkrétní model byl...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 představuje specializovanou variantu široce používané lidské osteosarkomové buněčné linie U-2 OS. Tento konkrétní model byl vytvořen tak, aby exprimoval SNAP-značenou verzi nukleoporinu Nup107, klíčové součásti komplexu jaderných pórů, který je nezbytný pro transport molekul mezi jádrem a cytoplazmou. Integrace technologie značení SNAP umožňuje biortogonální značení a vizualizaci Nup107 v živých nebo fixovaných buňkách, což poskytuje výkonný nástroj pro studium nukleocytoplazmatického transportu a architektury komplexu jaderných pórů za fyziologických podmínek.

Pozadí U-2 OS nabízí několik výhod, včetně robustní rychlosti růstu a dobře charakterizovaného karyotypu, které podporují vysoce výkonné screeningové aplikace a genomické studie. Technologie ZFN (Zinc Finger Nuclease) použitá v této buněčné linii usnadňuje cílenou editaci genomu, což zvyšuje přesnost, s níž mohou výzkumníci zkoumat genetický přínos k jadernému transportu a dalším buněčným procesům. Tato buněčná linie je zvláště užitečná pro studie zaměřené na objasnění dynamiky a regulace komplexů jaderných pórů v biologii rakoviny a buněčné fyziologii.

Vzhledem ke specializované povaze buněčné linie U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 č. 294 je velmi vhodná pro pokročilé zobrazovací techniky, včetně mikroskopie se superrozlišením, které umožňují zkoumat funkce nukleoporinů v dosud nevídaných detailech. Je také cenným zdrojem pro vývoj terapeutických strategií zaměřených na jaderné transportní dráhy, které se podílejí na různých onemocněních, včetně rakoviny. Složka SNAP-tag zvyšuje univerzálnost pro další biochemické a proteomické analýzy, což z něj činí nepostradatelný nástroj v oblasti buněčné a molekulární biologie.

Tkáň
Kost
Nemoc
Osteosarkom

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (katalogové číslo Cytion 300294)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Vkladatel
Ellenbergova laboratoř (EMBL)

04Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
SNAP-Nup107 (protein jaderného pórového komplexu 107, značka SNAP)

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilní glutamin, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS, 3,0 g/l glukózy, stabilní glutamin, 2,0 mM pyruvát sodný, 2,2 g/l NaHCO3, 1% NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
15 let
Etnická příslušnost
Kavkazský