U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple je geneticky upravená buněčná linie osteosarkomu odvozená od lidské buněčné linie U-2 OS, která je známá svými robustními růstovými vlastnostmi a použitelností v různých biologických studiích. Tento konkrétní klon byl upraven pomocí technologie editace genů CRISPR/Cas9 tak, aby do genu NUP96 byl začleněn mMaple, fotokonvertibilní fluorescenční protein. Protein mMaple umožňuje pokročilé zobrazovací techniky, jako je zobrazování živých buněk a mikroskopie se superrozlišením, a poskytuje dynamický pohled na chování komplexu jaderných pórů (NPC) a mechanismy buněčného importu a exportu přes jaderný obal.

Gen NUP96, který kóduje klíčovou složku NPC, je nezbytný pro nukleocytoplazmatický transport. Změna NUP96 může ovlivnit nejen transportní mechanismy, ale také celkovou jadernou architekturu a funkci. Tato buněčná linie tak slouží jako vynikající model pro studium patologií souvisejících s NPC a úlohy jaderného transportu v buněčném metabolismu a signalizaci. Integrace mMaple do NUP96 umožňuje sledování a vizualizaci dynamiky NUP96 v reálném čase in vivo, což z ní činí nepostradatelný nástroj pro výzkumníky zaměřené na studium buněčného jádra a pro ty, kteří zkoumají důsledky dysfunkcí NPC u onemocnění, jako je rakovina a virové infekce.

Jako specializovaný nástroj podporuje U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple klon č. 16 zobrazování s vysokým rozlišením a poskytuje podstatné údaje týkající se prostorové a časové distribuce složek NPC. Je zvláště cenný pro experimenty vyžadující podrobnou analýzu genové exprese, lokalizace proteinů a jaderného transportu za fyziologických a patologických podmínek, což usnadňuje hlubší pochopení buněčných procesů na molekulární úrovni.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení