U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

La lignée cellulaire U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple est une lignée cellulaire d’ostéosarcome génétiquement modifiée dérivée de la lignée cellulaire humaine U-2 OS, connue pour ses caractéristiques de croissance vigoureuses et son utilité dans diverses études biologiques. Ce clone particulier a été modifié à l’aide de la technologie d’édition génétique CRISPR/Cas9 afin d’intégrer mMaple, une protéine fluorescente photoconvertible, dans le gène NUP96. La protéine mMaple permet l’utilisation de techniques d’imagerie avancées, telles que l’imagerie de cellules vivantes et la microscopie à super-résolution, offrant ainsi un aperçu dynamique du comportement du complexe des pores nucléaires (NPC) et des mécanismes d’import-export cellulaires à travers l’enveloppe nucléaire.

Le gène NUP96, qui code pour un composant essentiel du NPC, est vital pour le transport nucléocytoplasmique. Une altération de NUP96 peut affecter non seulement les mécanismes de transport, mais aussi l’architecture et la fonction nucléaires globales. Cette lignée cellulaire constitue donc un excellent modèle pour l’étude des pathologies liées au NPC et du rôle du transport nucléaire dans le métabolisme et la signalisation cellulaires. L’intégration de mMaple dans NUP96 permet le suivi et la visualisation en temps réel de la dynamique de NUP96 in vivo, ce qui en fait un outil indispensable pour les chercheurs spécialisés dans l’étude du noyau cellulaire et ceux qui explorent les implications des dysfonctionnements du NPC dans des maladies telles que le cancer et les infections virales.

En tant qu’outil spécialisé, le clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple n° 16 permet une imagerie à haute résolution et fournit des données substantielles concernant la distribution spatiale et temporelle des composants du NPC. Il s’avère particulièrement utile pour les expériences nécessitant une analyse détaillée de l’expression génique, de la localisation des protéines et du transport nucléaire dans des conditions physiologiques et pathologiques, facilitant ainsi une compréhension plus approfondie des processus cellulaires au niveau moléculaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.