U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple 是一种基因工程骨肉瘤细胞系，源自人类 U-2 OS 细胞系。该克隆使用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术进行了改造，在 NUP96 基因中加入了可光电转换的荧光蛋白 mMaple。mMaple 蛋白可用于先进的成像技术，如活细胞成像和超分辨率显微镜，从而提供对核孔复合体（NPC）行为和细胞通过核膜进出口机制的动态了解。

NUP96 基因编码核孔复合体的一个重要组成部分，对核胞质转运至关重要。NUP96 基因的改变不仅会影响转运机制，还会影响整个核结构和功能。因此，该细胞系是研究 NPC 相关病理以及核转运在细胞代谢和信号转导中的作用的绝佳模型。将 mMaple 集成到 NUP96 中可以实时跟踪和可视化 NUP96 在体内的动态变化，使其成为专注于细胞核研究的研究人员以及探索 NPC 功能障碍在癌症和病毒感染等疾病中的影响的研究人员不可或缺的工具。

作为一种专用工具，U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple 克隆 16 号支持高分辨率成像，并能提供有关 NPC 成分空间和时间分布的大量数据。它对于需要详细分析生理和病理条件下基因表达、蛋白质定位和核转运的实验特别有价值，有助于在分子水平上更深入地了解细胞过程。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。