U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP是一种转基因骨肉瘤细胞系，来源于母本U-2 OS人类细胞系。该细胞系通过 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑技术进行改造，在 NUP96 基因上加入了 SNAP 标记，从而实现了核孔复合体动态的可视化研究。核孔复合体（NPC）对核胞浆转运的调控至关重要，而 NUP96 是 NPC 的重要组成部分，对其结构完整性和功能起着关键作用。

在 U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP 克隆 33 号中，NUP96 基因座上整合了 SNAP 标记，可以特异性共价连接荧光底物或其他化学探针，用于活细胞成像和其他生化检测。这一特性使其成为研究核细胞质转运的分子动力学、了解鼻咽癌相关病理以及筛选影响鼻咽癌功能的治疗化合物的宝贵工具。该细胞系还保留了亲本 U-2 OS 系的特点，包括高度的遗传稳定性和易于培养，因此适用于细胞生物学的高通量筛选和扩展研究。

由于 NUP96 基因修饰的特异性，U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP 克隆 33 号为详细研究细胞功能和功能障碍背景下的 NPC 成分提供了一个独特的模型。研究人员可以利用 SNAP 标记系统选择性地快速标记 NUP96，从而促进生理和病理条件下 NPC 动态的实时可视化。这种特异克隆可作为基础研究和应用生物医学研究的强大平台，为细胞生物学、遗传学和肿瘤学领域做出重大贡献。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。